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- Avanços na investigação sobre linfomas : do diagnóstico à terapiaPublication . Mira, Alexandra Sofia de Almeida; Universidade de Lisboa; Fernandes, Adelaide Maria Afonso; Barroca, Maria Gabriel André Aparício SilvestreA presente dissertação, concebida para a conclusão do Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa, compreende duas partes distintas: uma monografia, que aborda os avanços na investigação de linfomas do diagnóstico à terapia, e um relatório detalhado do estágio curricular, realizado no laboratório SYNLAB Alentejo, em Évora. A monografia aborda a complexidade dos linfomas, tumores sólidos que resultam da transformação neoplásica de linfócitos, caracterizados por elevada heterogeneidade. São das malignidades hematológicas mais prevalentes, dividindo-se em linfomas de Hodgkin e não-Hodgkin. Neste contexto, as entidades mais frequentes são caraterizadas, de acordo com a classificação da OMS mais recente (2022), quanto à sua apresentação clínica, histopatologia, biologia molecular e imunofenotipagem, que são de extrema importância para realizar um diagnóstico preciso e selecionar a abordagem terapêutica mais adequada. Embora a resposta à quimioterapia, radioterapia e terapias combinadas seja satisfatória, a existência de uma grande variedade de subtipos, com diferentes cursos de crescimento, exige a busca contínua por abordagens alternativas, particularmente relevantes para casos com menor resposta a tratamentos convencionais, nomeadamente os casos recidivantes/refratários e para mitigar efeitos secundários. No relatório de estágio é brevemente apresentado o local de estágio e descritas as atividades práticas desenvolvidas, durante um período relativo a 6 meses e de acordo com o plano de estágio estruturado. São detalhadas as etapas do processo analítico, desde a fase pré-analítica, até às diferentes secções da fase analítica, nomeadamente a hematologia, bioquímica clínica e microbiologia. Em cada uma das valências mencionadas são definidos os parâmetros analisados, os métodos e respetivos equipamentos utilizados. Além disso, são também destacados os procedimentos de controlo de qualidade interno e os programas de avaliação externa de qualidade em que o laboratório participa.
- Tendências na sustentabilidade de produtos cosméticos : cosméticos personalizados e inclusivosPublication . Oliveira, Liliana Gonçalves; Universidade de Lisboa; Marto, Joana MarquesNos últimos anos, a sustentabilidade da indústria cosmética tem vindo a assumir uma relevância crescente no quotidiano da população. Paralelamente, têm surgido novas tendências que impulsionam a inovação neste setor, como o desenvolvimento de cosméticos personalizados e inclusivos, nos quais são consideradas as expectativas e necessidades específicas do consumidor final. Grande parte das marcas tem vindo a introduzir alterações não só nos seus produtos, mas também na forma como os comunicam, garantindo sempre o bem-estar da população e a preservação da saúde humana. Porém, é necessário a disseminação de novas orientações para implementar estes cosméticos no mercado europeu, de modo a colmatar as lacunas existentes entre os vários pontos já discutidos e aprovados na regulamentação atualmente em vigor. Esta dissertação pretende avaliar as lacunas existentes a nível regulamentar na implementação de cosméticos personalizados e inclusivos, bem como discutir as soluções que podem ser adotadas para ultrapassar esses obstáculos. Para além disso, pretende-se resumir a relação entre a indústria cosmética e o desenvolvimento de formulações mais inclusivas e personalizadas, destacando os impactos na sustentabilidade. Após a revisão da literatura é descrito o conjunto de estratégias que podem ser implementadas e, consequentemente, promover o desenvolvimento de recomendações para facilitar a implementação de cosméticos personalizados e inclusivos no mercado. Desta forma, esta dissertação ambiciona contribuir para uma indústria cosmética mais adaptada às necessidades da sociedade atual, aliando inovação, inclusão e sustentabilidade no respeito pelas exigências regulamentares.
- Assessing the nutritional and phytochemical composition of raw and processed Lathyrus sativus L. : focus on the fermented productsPublication . Santos, David Tavares dos; University of Lisbon; Mecha, Elsa Velez; Duarte, Noélia Maria da Silva DiasA espécie Lathyrus sativus, comumente chamada de chícharo, é uma planta leguminosa conhecida pela sua notável resiliência a condições ambientais adversas, incluindo a seca. Esta leguminosa, frequentemente esquecida, tem o potencial de servir como uma fonte significativa de nutrientes, compostos bioativos e proteínas, sendo uma fonte importante de aminoácidos essenciais, especialmente em regiões onde outras fontes de proteína são limitadas. É utilizado em muitas cozinhas tradicionais, especialmente no sul da Europa, Índia e África, em pratos como sopas, guisados e farinhas. No entanto, até à data não existem estudos que caracterizem a biodiversidade dos acessos de chícharo e que investiguem os efeitos das técnicas de processamento tradicionais, como a fermentação, na composição antinutricional e na qualidade proteica do chícharo. O uso alimentar de Lathyrus sativus é limitado pela presença de β-ODAP, um aminoácido neurotóxico. O consumo excessivo pode provocar neurolatirismo, uma doença neurodegenerativa, reduzindo a aceitação por parte do consumidor. Embora os casos de envenenamento por ODAP tenham se tornado menos frequentes devido ao aprimoramento das técnicas de processamento e ao aumento da conscientização, a dependência excessiva do chícharo em dietas de emergência nos países em desenvolvimento ainda representa um risco em algumas regiões do mundo. A investigação e o melhoramento genético de plantas visando a redução dos níveis de ODAP têm sido também abordagens importantes para prevenir o envenenamento em comunidades vulneráveis. Este estudo analisou amostras obtidas junto de quinze agricultores portugueses e de um agricultor francês, adquiridas através de parceiros da DivinFood. A investigação comparou os fatores anti nutricionais, a composição em aminoácidos, a atividade antioxidante in vitro e os níveis de α/β-ODAP em amostras de chícharo não processadas e as submetidas a vários métodos de processamento, incluindo cozedura, imersão e fermentação. Além disso, o estudo examinou como estas técnicas de processamento influenciaram características os parâmetros analisados. A análise de amostras de chícharo, tanto processadas como não processadas, revelou diferenças significativas. As amostras não processadas continham níveis elevados de saponinas (0,125 ± 0,038 mg AE/g DW), ácido fítico (8,768 ± 0,524 mg/g DW) e inibidores de tripsina (2,927 ± 0,142 TUI/mg DW), juntamente com concentrações elevadas de β- ODAP (7,85 ± 1,64 mg/g DW). Em contraste, as amostras processadas demonstraram uma maior biodisponibilidade dos compostos fenólicos totais, levando a um aumento da atividade antioxidante e a uma redução significativa dos níveis de β-ODAP. Estas descobertas sublinham o potencial da fermentação como uma estratégia eficaz para melhorar a segurança alimentar e potenciar os benefícios do chícharo para a saúde, tornando-a uma opção mais viável para uma nutrição sustentável. Esta dissertação de mestrado foi desenvolvida como uma componente integrante do projeto europeu DIVINFOOD e está alinhada com os Objetivos de Desenvolvimento Sustentável (ODS) das Nações Unidas, particularmente aqueles que visam erradicar a fome e promover a saúde e o bem-estar. A iniciativa DIVINFOOD defende a biodiversidade na agricultura e na nutrição integrando o conhecimento tradicional, as práticas sustentáveis e a inovação alimentar. Enfatiza igualmente, o cultivo de uma gama diversificada de culturas, especialmente espécies subutilizadas, para aumentar a segurança alimentar e a resiliência climática. Ao incorporar alimentos tradicionais e autóctone, a DIVINFOOD não só apoia a herança cultural, como também aumenta a diversidade alimentar. Além disso, técnicas inovadoras de processamento de alimentos, como a fermentação, contribuem para aumentar a biodisponibilidade dos nutrientes e reduzir os fatores antinutricionais. Esta abordagem abrangente promove sistemas alimentares sustentáveis que priorizam a saúde, a sustentabilidade ambiental e a resiliência alimentar global.
- Enable the development of dissolution models as a path to real-time release testing in a continuous manufacturing environmentPublication . Batista, Sara Campelos; Faculty of Pharmacy; Almeida, António José Leitão das NevesNum contexto de produção contínua, garantir a qualidade e conformidade do produto requer estratégias de monitorização e controlo em tempo real. O teste de dissolução, tradicionalmente realizado offline, continua a ser um processo demorado e que consome recursos. Este trabalho foca-se no desenvolvimento de modelos de dissolução de forma a viabilizar o real-time release testing, um passo crítico para aumentar a eficiência, reduzir custos e facilitar os requisitos regulatórios. Neste trabalho, modelos mecanísticos de dissolução foram combinados com técnicas quimiométricas para permitir a previsão de perfis de dissolução de comprimidos de libertação imediata. Três modelos – erosion, z-factor, e modified N-W – foram avaliados nesta dissertação. As equações foram ajustadas a dados de dissolução experimentais com o objetivo de obter parâmetros otimizados. Foram construídos modelos de PLS para correlacionar os dados espectrais de misturas e comprimidos com os parâmetros das equações. Foi também realizada uma validação externa para avaliar a performance de cada modelo. Os resultados mostraram que todos os modelos apresentaram um bom ajuste aos dados experimentais, enquanto o modelo erosion demonstrou o maior poder preditivo. Adicionalmente, nesta tese foi definido um procedimento para calibrar modelos preliminares de dissolução com apenas experiências laboratoriais.
- Alimentação, microbioma e doenças inflamatórias intestinaisPublication . Silva, Susana Teresa de Matos Godinho; Universidade de Lisboa; Ribeiro, Maria Henriques Lourenço; Figueira, Maria Eduardo da Costa MorgadoO corpo humano é constituído por bactérias cuja população é dez vezes superior ao número de células humanas, estando a maioria localizada no trato gastrointestinal. Estima-se que sejamos portadores de milhões de bactérias, fungos e vírus. A microbiota humana refere-se à comunidade de microrganismos que vivem em todas as partes do corpo e desempenham papéis fundamentais quer na saúde humana quer nas doenças, Por outro lado, o microbioma abrange uma realidade completamente diferente: trata-se do material genético dessa comunidade. O microbioma é único em cada indivíduo, tal como uma impressão digital. É também dinâmico e vai-se modificando ao longo do ciclo de vida. Fatores como a temperatura, humidade, nutrição, recetores do hospedeiro, stress oxidativo, resposta imunológica inata e específica contra os microrganismos bem como a competição entre estes e respetiva resistência aos produtos de secreção são fatores determinantes para a composição do microbioma de cada indivíduo. Uma microbiota funcional resulta do equilíbrio entre as diferentes populações microbianas que coexistem. Esse equilíbrio é chamado de eubiose e, quando é alterado ocorre o que se define como disbiose, que se traduz num desequilíbrio entre as populações de bactérias benéficas e prejudiciais, dando origem a problemas de saúde. A alteração da alimentação e a prática de dietas restritivas podem levar ao aparecimento de alterações que predisponham o hospedeiro a sintomas patológicos adicionais. Por outro lado, a suplementação com pré e probióticos pode ser útil na recuperação e manutenção da microbiota intestinal.
- HTLV-1: patogénese e diagnóstico : relatório de estágioPublication . Amorim, Glauber Lopes; Universidade de Lisboa; Pereira, José Miguel Azevedo; Fernandes, Cláudia Sofia Silva Pereira FormosinhoO presente documento encontra-se dividido em duas secções, primariamente o relatório de estágio e em seguida a monografia. O relatório de estágio engloba as tarefas desempenhadas, as atividades laboratoriais e os conhecimentos assimilados ao longo do período de estágio, que foi realizado no Laboratório de Análises Clínicas RedeLab Saúde – Celeste Formosinho Análises Clínicas. Este estágio se deu no contexto do Mestrado em Análises Clínicas da Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa. Ao longo deste relatório, são detalhadas as principais atividades desenvolvidas nas áreas laboratoriais da Fase PréAnalítica, Microbiologia, Química Clínica e Hematologia. A presente monografia consiste numa revisão abrangente da literatura científica, onde o tema central é: “HTLV-1: Patogénese e diagnóstico”. O vírus linfotrópico das células T humanas tipo 1, classificado como oncoretrovírus, infeta preferencialmente células T CD4+ e está diretamente associado ao desenvolvimento de diversas patologias. Entre as patologias mais expressivas, destacam-se a leucemia/linfoma de células T do adulto e a mielopatia associada ao HTLV-1/paraparésia espástica tropical as mais expressivas, devido ao prognóstico desfavorável e os impactos negativos na qualidade de vida dos doentes. A principal característica epidemiológica do vírus HTLV-1 consiste na existência de elevada incidência em diversas regiões endémicas, como sul do Japão, Caribe, Africa subsaariana, América do Sul, Médio Oriente e a região AustraloMelanésia. As formas de transmissão mais comuns são através da amamentação, por via sexual e através de transfusões sanguínea e transplante de órgãos. O presente trabalho visa expor as principais características do vírus HTLV-1, abordando os aspetos epidemiológicos, formas e mecanismos de transmissão, ciclo viral e, sobretudo, os mecanismos patogénicos das principais patologias associadas a esta infeção viral. Além disso, serão discutidas as estratégias de diagnóstico e prevenção atuais, com o intuito de contribuir para uma melhor compreensão das doenças causadas pelo vírus e do patógeno em sí, e suas implicações na saúde.
- Alimentos geneticamente modificados na promoção da saúdePublication . Vale, Daniela Cristina Pereira do; Universidade de Lisboa; Ribeiro, Maria Henriques LourençoAo longo do tempo, tem havido avanços na biotecnologia, e os alimentos geneticamente modificados, foram uma das principais inovações na agricultura e na nutrição, permitindo a introdução de caraterísticas desejáveis, como a resistência a pragas, melhorias a nível nutricional e aumento da vida útil do alimento. Esta dissertação aborda o papel dos AGMs na promoção da saúde humana, destacando o seu potencial na biofortificação de alimentos, na prevenção de doenças relacionadas a carências nutricionais e redução do uso de agroquímicos. São analisadas as principais técnicas de produção de AGMs, incluindo a transformação via Agrobacterium tumefaciens, a biobalística , a eletroporação, e novas técnicas, bem como o panorama legislativo europeu e português. Os resultados evidenciam que os AGMs oferecem benefícios significativos, como o arroz dourado enriquecido com vitamina A, a mandioca biofortificada com ferro e zinco e a soja com perfil lipídico otimizado, que podem reduzir deficiências nutricionais em populações vulneráveis. Adicionalmente, a utilização de culturas resistentes a pragas diminui a aplicação de pesticidas, beneficiando a saúde pública. Existem desafios e algumas controvérsias, incluindo principalmente preocupações sobre os potenciais riscos para a saúde humana, impactos ambientais e aceitação pública. Assim as perspetivas futuras incluem a integração de AGMs como alimentos funcionais e auxiliares da terapêutica, contribuindo para a nutrição personalizada e a segurança alimentar global, desde que acompanhados por uma regulamentação rigorosa e uma comunicação científica transparente.
- Applications of natural deep eutectic solvents (NADES) in topical formulationsPublication . Fonseca, Ana Teresa Clérigo; University of Lisbon; Marto, Joana Marques; Paiva, Alexandre Babo de AlmeidaO crescente interesse por cosméticos sustentáveis, seguros e eficazes impulsionou a necessidade de matérias-primas inovadoras que cumpram as normas ambientais e regulamentares. Assim, os solventes eutéticos naturais profundos (NADES) surgiram como uma alternativa sustentável aos solventes convencionais devido à sua não toxicidade, biodegradabilidade e biocompatibilidade. Considerando isso, este projeto tem como objetivo investigar a aplicação de NADES em formulações tópicas, como champôs e emulsões O/W, para avaliar a sua segurança e eficácia em formulações tópicas. Foram desenvolvidos cinco NADES diferentes, que foram subsequentemente submetidos a uma caracterização físico-química detalhada, incluindo análises reológicas, texturais e superficiais, e depois incorporados em formulações de champô. Em comparação com os controlos, os champôs com NADES apresentaram melhor recuperação estrutural, atributos sensoriais melhorados e perfis de segurança in vitro aceitáveis, conforme determinado por ensaios MTT em queratinócitos HaCaT. Todos os cinco NADES foram testados como estabilizadores de emulsões O/W. No entanto, após sete dias, todas as emulsões apresentaram separação de fases, indicando que os NADES devem ser combinados com emulsionantes convencionais para estabilidade a longo prazo. O papel dos NADES como solventes de extração ecológicos também foi estudado, utilizando subprodutos de tremoço. Através de ensaios como DPPH, FRAP e TPC, foi possível determinar a atividade antioxidante e quantificar o teor de compostos fenólicos dos extratos resultantes das extrações NADES. Foram desenvolvidos testes de inibição da elastase neutrofílica humana (HNE) e citotoxicidade para determinar a segurança e a eficácia dos extratos. O extrato com melhor desempenho foi incorporado em emulsões O/W, que foram submetidas a testes estruturais, reológicos, microscópicos e de estabilidade abrangentes. As emulsões apresentaram tamanho de gotículas, textura e desempenho de armazenamento favoráveis, mantendo a segurança e a bioatividade. Este projeto destaca a multifuncionalidade dos NADES em dermocosméticos, servindo como solventes ecológicos, modificadores de textura e transportadores de compostos bioativos, ao mesmo tempo que se alinha com os princípios da química verde e da economia circular. O uso de subprodutos agroindustriais, como resíduos de tremoço, aumenta a sustentabilidade, reforçando o potencial dos NADES na criação de cosméticos inovadores e ambientalmente responsáveis.
- Targeted microbiome analysis in Human health and precision medicinePublication . Pinheiro, Henrique Simões; University of Lisbon; Refinetti , Paulo; Santos, André Fernando Anastácio dosStaphylococcus aureus é uma bactéria Gram-positiva comumente presente no organismo humano e associada a diversas doenças e infeções, tais como pneumonia, sífilis e infeções de pele e tecidos moles. Até à década de 1990, as infeções por S. aureus resistente à meticilina (MRSA) ocorriam principalmente em contexto hospitalar. Contudo, a partir dos anos 2000, verificou-se um aumento global de casos de infeções por MRSA fora dos hospitais, num cenário designado por MRSA adquirido na comunidade. Estes surtos tornaram-se mais frequentes e podem propagar-se facilmente a indivíduos saudáveis. Como as estirpes de MRSA são resistentes à maioria dos antibióticos β-lactâmicos e frequentemente transportam genes adicionais de resistência, as opções terapêuticas disponíveis para o tratamento de indivíduos infetados são muitas vezes severamente limitadas. Assim, torna-se crucial acelerar a identificação das estirpes de MRSA em caso de infeção. No entanto, os testes atualmente disponíveis requerem, pelo menos, 2 a 4 dias, limitando as opções de tratamento e a janela terapêutica. Neste contexto, propõe-se o desenvolvimento de uma ferramenta de diagnóstico capaz de identificar MRSA em amostras complexas num único dia. Para além disso, o baixo custo do teste permite a sua utilização em países em desenvolvimento, onde, devido a recursos limitados, as ferramentas de diagnóstico não são empregues de forma ideal. Esta situação é preocupante, uma vez que esses países podem constituir pontos de partida para surtos e para o aparecimento de novos genes de resistência. Assim, é essencial que o ensaio esteja acessível ao maior número possível de indivíduos. Para tal, foram especificamente desenhados primers utilizando o software da REM Analytics, combinados com a Eletroforese Capilar com Temperatura Cíclica (CTCE – Cycling Temperature Capillary Electrophoresis), permitindo distinguir MRSA de Staphylococcus aureus sensível à meticilina.
- Importância dos compostos fenólicos dos alimentos na promoção da saúdePublication . Gameiro, Eduarda Mendes Mogas; Universidade de Lisboa; Figueira, Maria Eduardo da Costa MorgadoAs doenças crónicas não transmissíveis afetam cada vez mais um número crescente de indivíduos. Entre os principais fatores de risco associados a estas doenças destaca-se a inflamação, o sedentarismo e uma alimentação desequilibrada o que contribui para o aparecimento de doenças crónicas como por exemplo a obesidade, a diabetes e o cancro. Devido aos avanços da investigação científica, hoje em dia sabe-se que os compostos fenólicos têm a capacidade de prevenir o desenvolvimento e progressão das doenças crónicas. Surge assim a ideia de que uma alimentação rica em compostos fenólicos apresenta benefícios na prevenção e tratamento de várias doenças crónicas. Os compostos fenólicos derivam de metabólitos secundários de plantas e estão muito presentes em alimentos como frutas e vegetais. Estes compostos têm tido um enorme destaque devido ás suas propriedades bioativas atuando como substâncias antioxidantes, anti-inflamatórias, anticancerígenas, antimetabólicas, antivirais e anti-bacterianas para além de terem uma atividade cardioprotetora e neuroprotetora essencial no nosso organismo.