A carregar...
Publicação
The neuroprotective effect of BDNF on oxidative DNA damage in rat cortical neurons : evaluation by comet assay
| Nome: | Descrição: | Tamanho: | Formato: | |
|---|---|---|---|---|
| 2.42 MB | Adobe PDF |
Orientador(es)
Resumo(s)
Alzheimer’s disease is an increasing prevalent disease nowadays although its
underlying mechanisms are not fully understood. In addition to other factors, it is known that the presence of amyloid-β peptide in the senile plaques of patients with Alzheimer disease, oxidative stress and neurotrophic deprivation are involved in the onset of the disease.
In vitro studies refer that incubation with BDNF prevented Aβ-induced apoptosis and also increased the activity of antioxidant enzymes. However, most studies only refer oxidative stress and the loss of cell viability and do not focus in oxidative damage particularly to the nuclear DNA.
In this study, the structural and oxidative DNA damage of primarily cultured rat
cortical neurons was measured by Comet Assay. The assay was performed after incubation with the Aβ25-35 peptide at sub-lethal concentrations for a 24 hour period and after a 10 minutes exposure to 10 μM H2O2 in the presence or absence of BDNF.
Although no DNA damage was observed after incubation with the Aβ25-35 peptide, the H2O2 incubation induced both structural and oxidative damage to the nuclear DNA, while a 48 hour pre-incubation with BDNF decreased the induced oxidative damage. This study thus provided a useful insight into BDNF’s protective effects on DNA damage. However, further studies are necessary to evaluate if the Aβ25-35 peptide induces DNA damage at higher concentrations.
A doença de Alzheimer é cada vez mais prevalente actualmente devido ao envelhecimento da população mundial, no entanto os mecanismos biológicos que levam ao seu aparecimento ainda não são conhecidos. Entre outros factores, sabe-se que a presença de agregados do péptido β-amilóide assim como o stress oxidativo e deprivação neurotrófica estão envolvidos no desenvolvimento da doença. Estudos in vitro demonstraram que a incubação com BDNF evita a apoptose de neurónios induzida pelo péptido β-amilóide assim como aumenta a actividade de enzimas antioxidantes. No entanto, a maioria dos estudos foca-se na presença de stress oxidativo e na perda de viabilidade celular, não estudando os níveis de dano ao DNA nuclear, especialmente de natureza oxidativa. Neste estudo, o dano estrutural e oxidativo ao DNA nuclear de culturas primárias de neurónios corticais de rato foi medido utilizando a técnica de Comet Assay. A técnica foi realizada após incubação com o péptido Aβ25-35 em concentrações subletais por um período de 24 horas e após exposição a 10 μM de H2O2 na presença ou ausência de BDNF. Apesar de nenhum dano ao DNA ter sido observado após incubação com o péptido Aβ25-35, a incubação com H2O2 induziu dano estrutural e oxidativo ao DNA nuclear sendo que uma pré-incubação com BDNF reduziu os níveis medidos de dano oxidativo. O presente estudo permitiu então determinar que o BDNF tem um efeito protector em condições de dano ao DNA. No entanto, são necessários mais estudos para avaliar se o péptido Aβ25-35 induz dano ao DNA quando presente em concentrações mais elevadas.
A doença de Alzheimer é cada vez mais prevalente actualmente devido ao envelhecimento da população mundial, no entanto os mecanismos biológicos que levam ao seu aparecimento ainda não são conhecidos. Entre outros factores, sabe-se que a presença de agregados do péptido β-amilóide assim como o stress oxidativo e deprivação neurotrófica estão envolvidos no desenvolvimento da doença. Estudos in vitro demonstraram que a incubação com BDNF evita a apoptose de neurónios induzida pelo péptido β-amilóide assim como aumenta a actividade de enzimas antioxidantes. No entanto, a maioria dos estudos foca-se na presença de stress oxidativo e na perda de viabilidade celular, não estudando os níveis de dano ao DNA nuclear, especialmente de natureza oxidativa. Neste estudo, o dano estrutural e oxidativo ao DNA nuclear de culturas primárias de neurónios corticais de rato foi medido utilizando a técnica de Comet Assay. A técnica foi realizada após incubação com o péptido Aβ25-35 em concentrações subletais por um período de 24 horas e após exposição a 10 μM de H2O2 na presença ou ausência de BDNF. Apesar de nenhum dano ao DNA ter sido observado após incubação com o péptido Aβ25-35, a incubação com H2O2 induziu dano estrutural e oxidativo ao DNA nuclear sendo que uma pré-incubação com BDNF reduziu os níveis medidos de dano oxidativo. O presente estudo permitiu então determinar que o BDNF tem um efeito protector em condições de dano ao DNA. No entanto, são necessários mais estudos para avaliar se o péptido Aβ25-35 induz dano ao DNA quando presente em concentrações mais elevadas.
Descrição
Tese de mestrado, Neurociências, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2013
Palavras-chave
Neurónios corticais Fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) Péptido Aβ25-35 H2O2 Ensaio Comet Dano ao DNA Teses de mestrado - 2013