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Publicação
Evaluation of the efficacy of CPP-ACP remineralising mousse in cases of MIH – in vitro Raman analysis
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Autores
Resumo(s)
A Hipomineralização incisivo molar é caracterizada pela hipomineralização de pelo menos um primeiro molar permanente frequentemente associado a incisivos também afetados.
Esta é uma patologia com origem numa agressão sistémica que leva a alterações da mineralização dos dentes e que consoante a fase de mineralização em que ocorrer essa agressão pode levar ao aparecimento de manchas amareladas que são mais profundas, ou brancas, que são mais superficiais.
Estas manchas, dado representarem uma maior porosidade do esmalte dão origem a uma elevada sensibilidade, o que torna as técnicas de controlo de placa bacteriana mais difíceis, tornando os dentes mais vulneráveis a lesões de cárie. Nos casos mais severos, o esmalte mais poroso pode acabar por originar fraturas pós-eruptivas de esmalte.
Por outro lado, há evidência de que o tecido pulpar de dentes hipomineralizados apresenta uma inflamação crónica, também devido à elevada porosidade que estes dentes apresentam.
A prevenção e diagnóstico precoce desta condição é crucial para a manutenção destes dentes nas melhores condições possíveis e sem dor associada.
O fosfopéptido de caseína e fosfato de cálcio amorfo (CPP-ACP) pode promover remineralização da camada mais superficial do esmalte, atuando como um depósito de cálcio e fosfato, estabilizando elevadas concentrações destes iões. Há evidência para um aumento da quantidade de fosfato em dentes desmineralizados, medido através da intensidade do pico da banda em Raman, após o tratamento com CPP-ACP, assim como maior formação de hidroxiapatite, o que pode explicar o aumento de remineralização. Também já foi demonstrado que a aplicação de pasta com CPP-ACP diminuiu o amolecimento e mudanças de morfologia da superfície do esmalte dentário quando este é exposto a erosão.
A espetroscopia Raman tem sido usada para estudar as diferenças no modo normal de vibração de alongamento simétrico do grupo fosfato que representa a porção mineral do dente. Vários estudos avaliaram estas diferenças através de lesões cariosas reais ou artificiais causadas por agentes desmineralizantes externos, como bebidas refrigerantes, agentes de branqueamento e estimulantes gustativos de secreção salivar.
A análise da banda de alongamento simétrico a 959 cm-1 e a sua anisotropia de polarização têm mostrado ser marcadores mais sensíveis de desmineralização, por exemplo, na deteção de lesões de cárie iniciais e da sua remineralização.
Objetivo
O objetivo deste estudo é compreender, através da análise da banda de alongamento simétrico a 959 cm-1 e da sua anisotropia de polarização com espetroscopia Raman, se o protocolo de aplicação de CPP-ACP utilizado, é eficaz na remineralização de esmalte hipomineralizado.
Materiais e Métodos
12 dentes (4 sãos, 4 hipomineralizados com manchas brancas e 4 hipomineralizados com manchas amarelas) foram submetidos a uma profilaxia com uma escova de polimento com pasta de pedra-pomes e água, em baixa rotação durante 60 segundos. Os espécimes foram lavados com água destilada durante 60 segundo e submetidas a um banho de ultrassons durante o mesmo tempo. Posteriormente, os dentes foram armazenados em solução de Hanks num ambiente refrigerado.
Foi realizada uma recolha de saliva, seguindo o protocolo em que o dador, realizou previamente a escovagem dentária e higiene interproximal, sem comer ou beber durante a hora seguinte. A recolha foi feita 5 minutos após o dador ter deglutido toda a saliva presente na sua cavidade oral.
Para analisar a razão de despolarização através da microscopia Raman, antes do tratamento, cada espécime foi removido da solução de Hanks, lavado com água destilada e seco. Foram efetuadas 20 medições em média em cada espécime, com espetroscopia Raman, e em cada medição foi analisada a banda de alongamento simétrico a 959 cm-1 e a sua anisotropia de polarização.
Após esta primeira análise, o protocolo de tratamento foi efetuado. Cada espécime foi coberto por uma camada de saliva, e uma porção do tamanho de uma ervilha de pasta GC Tooth Mousse contendo CPP-ACP foi aplicada com uma zaragatoa de modo a criar uma camada uniforme com cerca de 1mm cobrindo toda a superfície do dente durante 3 minutos. Em seguida, foi adicionada saliva suficiente para cobrir todo o espécime e toda a mistura foi friccionada no dente durante 10 segundos, deixando depois repousar por 30 minutos. Cada espécime foi lavado com água destilada, seco e novamente analisada com o microscópio Raman de forma a determinar a razão de despolarização pós-tratamento.
A análise estatística foi realizada através dos testes Shapiro-Wilk, para avaliar a normalidade, seguido pelo Paired T-Student e o Wilcoxon Sign Rank, para os grupos com distribuição normal e não normal, respetivamente. O nível de significância considerado foi 0,05.
Resultados
Os valores médios (desvio padrão) da razão de despolarização para o grupo de dentes sãos foram 0.020 (0.004) e 0.019 (0.003) pré- e pós-tratamento, respetivamente. Não se verificaram diferenças estatisticamente significativas na mineralização do esmalte neste grupo, antes e depois do tratamento (p>0,05). Para o grupo de dentes hipomineralizados com manchas brancas, os valores médios (desvio padrão) obtidos para a razão de despolarização, antes e depois do tratamento foram, respetivamente, 0.023 (0.003) e 0.018 (0.003), sendo esta diferença estatisticamente significativa (p<0,05). Também no grupo de dentes hipomineralizados com manchas amarelas, a diminuição da razão de despolarização é significativa (p<0,05), passando os valores médios (desvio padrão) de 0.03 (0.01) para 0.026 (0.006) com a aplicação do tratamento.
Discussão
Neste estudo, recorrendo à análise Raman foi possível observar que o protocolo de tratamento utilizado para a aplicação da pasta de CPP-ACP teve um efeito significativamente positivo na redução da razão de despolarização na superfície de esmalte das manchas hipomineralizadas.
Em esmalte são, os cristais estão orientados perpendicularmente à superfície de esmalte. Por outro lado, sabe-se que a direção dos cristais muda com a desmineralização do esmalte, ficando a estrutura mais desorganizada e os cristais deixam de estar paralelos entre si. Por isso, em esmalte desmineralizado, o valor da razão de despolarização é maior.
Através dos valores da razão de despolarização, foi possível observar uma melhoria na organização dos cristais, comparando o antes e depois da aplicação da pasta de CPP-ACP, sendo possível deduzir que a resistência das amostras aumentou após o tratamento, de acordo com um estudo encontrado na literatura que conclui que os dentes com maior resistência à cárie têm uma maior proporção de cristais bem orientados, afirmando que o nível de organização dos cristais de hidroxiapatite pode ser uma propriedade relevante para determinar a resistência do esmalte dentário.
Os dentes hipomineralizados, com manchas desde o branco ao amarelo acastanhado, dependendo da severidade dos casos, apresentam na microestrutura do esmalte um padrão de
cristais de hidroxiapatite muito desorganizado, o que, possivelmente, pode causar a redução das propriedades mecânicas como a dureza e os módulos de elasticidade.
Através da aplicação de um protocolo de tratamento com CPP-ACP foi possível melhorar os valores médios da razão de despolarização nos espécimes com mancha branca e deixá-los ao mesmo nível dos espécimes de dente saudável, e os dos espécimes com mancha amarela ao nível dos espécimes com mancha branca.
De futuro, seria interessante alterar o protocolo de tratamento de forma a conseguir melhorar ainda mais os valores médios da razão de despolarização dos espécimes com mancha amarela ao nível dos espécimes de dente saudável.
O CPP-ACP tem a capacidade de aderir ao esmalte e sobressaturar o meio com iões de cálcio e fosfato livres, o que acaba por suprimir o processo de desmineralização e promove a remineralização. A presença de CPP-ACP permite uma recuperação rápida das concentrações de cálcio e uma remineralização precoce.
Apesar de ter sido observado, no grupo de dentes saudáveis, uma diminuição da razão de despolarização depois da aplicação do protocolo de tratamento, esta diferença não foi estatisticamente significativa.
O protocolo utilizado foi baseado nas instruções do fabricante, e assim conseguiu-se reduzir as razões de despolarização, ou seja, conseguiu-se melhorar o grau de organização e orientação dos cristais. Um outro estudo, que utilizou um protocolo muito idêntico, obteve melhorias na morfologia da superfície do esmalte assim como na sua dureza. Já outro estudo observou que a aplicação da pasta de CPP-ACP não só causou melhorias a nível da dureza da superfície do esmalte, mas também na perda de mineral.
Existe evidência de que a saliva humana, utilizada neste estudo, permite reduzir a perda mineral no armazenamento de amostras dentárias. Já a saliva artificial, normalmente é incapaz de formar uma pelicula protetora que funciona como barreira entre a superfície dentária e os ácidos do meio.
Por outro lado, este estudo mostrou a necessidade de se realizar mais pesquisa utilizando este tipo de tecnologia e protocolos. Neste caso, o estudo foi in vitro, e seria interessante analisar in vivo, o efeito deste produto na remineralização do esmalte hipomineralizado. Também outros estudos com protocolos com ciclos de desmineralização e remineralização, tempos de aplicação diferentes ou múltiplas aplicações, são importantes para validar os resultados aqui obtidos.
Conclusões
Este estudo mostrou uma melhoria na orientação dos cristais como consequência do uso da pasta Tooth Mousse contendo CPP-ACP, especialmente em manchas hipomineralizadas brancas e amarelas, presentes em casos de hipomineralização incisivo molar.
Purpose: The purpose of this study is to evaluate the efficacy of CPP-ACP mousse in remineralising enamel in cases of Molar-incisor-hypomineralisation. Methods: 12 teeth (4 healthy, 4 hypomineralised with white opacities and 4 hypomineralised with yellow opacities) went through a prophylactic cleansing protocol followed by the application of a treatment protocol with GC Tooth Mousse containing CPP-ACP (GC, Tokyo, Japan). Before and after treatment the depolarization ratio of the phosphate band was measured in each tooth using Raman microscopy. Results: The mean depolarization ratio values of the symmetric stretching band of phosphate decreased in all three groups, after the treatment protocol. The differences were significant (p<0.05) for the two hypomineralised teeth’ groups. Conclusions: This study showed an improvement of mineral density after using a specific protocol of Tooth Mousse containing CPP-ACP application, on white and yellow hypomineralised lesions, present in molar-incisor-hypomineralization cases.
Purpose: The purpose of this study is to evaluate the efficacy of CPP-ACP mousse in remineralising enamel in cases of Molar-incisor-hypomineralisation. Methods: 12 teeth (4 healthy, 4 hypomineralised with white opacities and 4 hypomineralised with yellow opacities) went through a prophylactic cleansing protocol followed by the application of a treatment protocol with GC Tooth Mousse containing CPP-ACP (GC, Tokyo, Japan). Before and after treatment the depolarization ratio of the phosphate band was measured in each tooth using Raman microscopy. Results: The mean depolarization ratio values of the symmetric stretching band of phosphate decreased in all three groups, after the treatment protocol. The differences were significant (p<0.05) for the two hypomineralised teeth’ groups. Conclusions: This study showed an improvement of mineral density after using a specific protocol of Tooth Mousse containing CPP-ACP application, on white and yellow hypomineralised lesions, present in molar-incisor-hypomineralization cases.
Descrição
Tese de mestrado, Medicina Dentária, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina Dentária, 2020
Palavras-chave
Saúde Oral Teses de mestrado - 2020