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Deteção e caracterização genética de Cryptosporidium spp. em águas superficiais e em animais do jardim Zoológico de Lisboa

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Resumo(s)

Cryptosporidium é o protozoário responsável pela criptosporidiose, uma doença gastrointestinal. Este organismo pode ser encontrado em humanos e em várias espécies de animais, e pode ser transmitido através de várias fontes de contaminação, tanto de forma direta como indireta. De momento existem 31 espécies descritas, umas mais importantes que outras para a saúde pública devido a serem zoonóticas, tais como C. parvum e C. hominis. Devido a este parasita ser bastante resistente aos vários desinfetantes utilizados no tratamento de água, como o cloro, é importante a vigilância de possíveis fontes de contaminação e estar atento a possíveis sintomas que possam surgir em pessoas ou animais provenientes de sistemas de água não tratados e consequentemente com maior risco de contaminação, de maneira a não haver o aparecimento de surtos, que poderão ter consequências nefastas. Este estudo teve como principal objectivo a deteção deste parasita e realizar a sua caracterização genética em fezes dos animais e na água do Jardim Zoológico de Lisboa. No decorrer do estudo foi possível a observação de várias espécies de animais infetados pelo mesmo, existindo um total de 40 positivos em 137 animais analisados através de microscopia por Coloração de Ziehl-Neelsen Modificada e PCR Quantitativo em Tempo Real, sendo que também se verificou a existência de Cryptosporidium em uma das amostras de água analisadas por PCR Quantitativo em Tempo Real. Das amostras positivas foi possível realizar a caraterização genética através da amplificação do gene 18S rRNA por PCR-RFLP de 4 amostras, obtendo-se positividade para a espécie C. muris em Pitão de Cheney (Morelia spilota cheynei) e Cobra do Milho (Pantherophis guttatus) e Cryptosporidium sp. em Pitão Real (Python regius) e Cobra Falsa Coral (Lampropeltis triangulum). Devido a não se ter conseguido obter uma caraterização genética da amostra de água, que obteve positividade para a presença do parasita, e de existir uma grande dispersão dos animais infetados no Jardim Zoológico não foi possível descobrir uma possível fonte de contaminação presente no mesmo, não permitindo assim criar medidas preventivas.
Cryptosporidium is the agent of cryptosporidiosis, a gastrointestinal disease, which can be found in humans and in a large number of animal species, and that can be transmitted by many contamination sources (via direct or indirect transmission). At this moment there are 31 species described, which some can be more important to public health because of their zoonotic potential, which is the case of C. parvum and C. hominis. Because of its higher resistance to disinfection products and because its maintenaice in contaminated water bodies, it is important to monitor possible sources of infection and stay vigilante to possible symptoms showed by people or animals from non-treatted water systems in order to prevent outbreaks that can lead to fatal consequences. This study aimed to detect and do the genetic characterization of the parasite in animal feces and water from the Lisbon Zoo. It was observed the infection of a various number of different species of animals being infected by this parasite, existing a total of 40 positive animals for the presence of Cryptosporidium at 137 analyzed by microscopy Modified Ziehl-Neelsen staining and quantitative Real-Time PCR, and 1 positive for its presence in a water sample analyzed by quantitative Real-Time PCR. There was possible to do the genetic characterization of 4 samples using PCR-RFLP to amplify the 18S rRNA gene, which identified C. muris in Carpet Python (Morelia spilota cheynei) and in a Corn Snake (Pantherophis guttatus) and Cryptosporidium sp. in a Ball Python (Python regius) and in a Milk Snake (Lampropeltis triangulum). Due to the lack of genetic characterization in the water sample, that was positive to the presence of the parasite, and the geographic dispersion of the infected animals in the Lisbon Zoo, was not possible to define a possible contamination source in the establishment, and so was not possible to create preventive measures.

Descrição

Tese de mestrado, Microbiologia Aplicada, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2017

Palavras-chave

Cryptosporidium Animais zoológico Coloração Ziehl-Neelsen Modificada PCR-RFLP PCR Quantitativo em Tempo Real Teses de mestrado - 2017

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