Publicação
Development of novel antibody-drug conjugated molecules for treatment of B-cell maligancies
| dc.contributor.advisor | Silva, Frederico Nuno Castanheira Aires da | |
| dc.contributor.advisor | Tavares, Luís Manuel Morgado | |
| dc.contributor.advisor | Gonçalves, João Manuel Braz | |
| dc.contributor.author | André, Ana Filipa Santos | |
| dc.date.accessioned | 2023-11-27T17:25:30Z | |
| dc.date.available | 2024-05-03T00:30:52Z | |
| dc.date.issued | 2023-11-03 | |
| dc.description | Tese especialmente elaborada para obtenção do grau de Doutor em Ciências Veterinárias na especialidade de Ciências Biológicas e Biomédicas | pt_PT |
| dc.description.abstract | Cancer is one of the leading causes of death worldwide, and is expected to continue increasing, with a projected 28.4 million cases by 2040. Dogs are also significantly affected by cancer, including NHL, which is one of the most common hematological malignancies in both species. Dogs are considered excellent models to accelerate the translation of treatments for human patients due to their similarities with humans. While immunotherapies, particularly monoclonal antibodies (mAbs), have brought specificity to cancer therapies, they are still mostly used in combination with conventional chemotherapy, which remains the standard of care for both species. However, conventional treatments still do not fully cure and have numerous adverse effects, highlighting the need for further improvement. To address this need, using the promising advantages of rabbit-derived sdAbs, we aimed to develop a platform for a novel sdAb drug delivery system for NHL treatment using the dog as an animal model. For this purpose, we explored three different drug delivery methods: ADCs, immunotoxins and immunoliposomes. For the development of ADC, we explored the potential of rabbit derived single-domain antibodies (sdAb) to selectively conjugate a payload towards cysteine at position 80. First, a rabbit-derived sdAb library against canine B-cell lymphoma receptors was subjected to in vitro and in vivo phage display. Then, VL sdAb that specifically targeted canine lymphoma cells in vitro and presented a good tumor uptake was selected for SN-38 site selective payload conjugation via its Cys80 and generated a stable and homogeneous C5- DAB-SN-38. This study validated a platform to develop novel ADCs that combine rabbit sdAbs benefits with the advantages of canine lymphoma model. Furthermore, this previously characterized and validated VL sdAb was also used to develop a new immunotoxin for the treatment of canine B-cell lymphoma. For that purpose, VL sdAb was conjugated with the PE38 toxin truncated form and tested in vitro in a canine B-cell lymphoma cells and in in vivo in a xenograft mouse model of canine lymphoma. This study validated immunotoxins as a potential treatment for canine lymphoma. Lastly, to validate a new liposome for canine lymphoma, we aimed to develop a liposome-based nanocarrier for panobinostat, using folate-targeted and non-targeted formulations. Both formulations were evaluated in canine lymphoma cells, validating liposomes as an effective treatment for canine lymphoma. In the future, our goal is to conjugate our VL sdAb to the liposome to obtain an immunoliposome for canine B-cell lymphoma. In conclusion, all the work developed contributed to the understanding of the importance of using the dog as a model and how these animals can contribute for clinical translation in the immune-oncology field | pt_PT |
| dc.description.abstract | RESUMO - Desenvolvimento de novos anticorpos conjugados a fármacos para o tratamento de tumores de células B - O cancro é umas das principais causas de morte e espera-se que os números continuem a crescer. Os cães são também muito afetados pelo cancro, sendo o linfoma não-Hodgkin um dos tipos de tumores hematológicos mais comuns em ambas as espécies. Devido às suas semelhanças, os cães são considerados um excelente modelo para acelerar a translação dos tratamentos para os humanos. Nas últimas décadas, os anticorpos monoclonais modificaram o tratamento na área do cancro trazendo-lhe especificidade. Contudo, a maioria dos anticorpos monoclonais não possuem por si só eficácia clínica e são atualmente utilizados em combinação com a quimioterapia. Assim, existe uma urgente necessidade de melhorar os tratamentos convencionais, que têm inúmeros efeitos adversos. Tendo isto em conta, e usando as vantagens promissoras dos anticorpos de pequeno domínio de coelho, tínhamos como objetivo criar uma plataforma para desenvolver novos sistemas de entrega de fármacos usando estes anticorpos para o tratamento de linfoma não-Hodgkin, usando o cão como modelo. Para isso, explorámos três tipos diferentes de sistemas: os anticorpos conjugados a fármacos, as imunotoxinas e os imunolipossomas. Para o desenvolvimento do anticorpo conjugado a fármaco, explorámos o potencial dos anticorpos de pequeno domínio de coelho para conjugar seletivamente com o fármaco através da cisteína 80. Para isso, selecionámos uma biblioteca de anticorpos contra recetores de linfoma canino de células B através de Phage display. Depois, o anticorpo VL que apresentava melhores características foi conjugado seletivamente com o fármaco SN-38 através da cisteína 80, obtendo a molécula C5-DAB-SN 38. Este trabalho validou uma plataforma para o desenvolvimento de novos anticorpos conjugados a fármacos que combinam os benefícios dos anticorpos de pequeno domínio de coelho com as vantagens do modelo canino de linfoma. Para além disso, este anticorpo foi também utilizado para desenvolver uma nova imunotoxina para o tratamento de linfoma canino de células B. Para isso, o anticorpo VL foi conjugado com a toxina PE38 e foi testado em células de linfoma canino de células B e no modelo murino xenografo. Este estudo validou as imunotoxinas como um potencial tratamento para o linfoma canino. Por fim, tínhamos como objetivo desenvolver um lipossoma para linfoma canino usando o Panobinostat, utilizando uma formulação com e sem folato. Ambas as formulações foram avaliadas em células de linfoma canino, validando os lipossomas como um tratamento eficaz para o linfoma canino. No futuro, o nosso objetivo é conjugar o anticorpo VL com o lipossoma para obter um imunolipossoma para linfoma canino de células B. Concluindo, todo o trabalho desenvolvido contribuiu para compreender a importância do uso do cão como modelo, e como estes animais podem contribuir para a translação clínica na área da imuno-oncologia | pt_PT |
| dc.description.version | N/A | pt_PT |
| dc.identifier.citation | André AFS. 2023. Development of novel antibody-drug conjugated molecules for treatment of B-cell maligancies [dissertation]. Lisboa: FMV-Universidade de Lisboa | pt_PT |
| dc.identifier.tid | 101573855 | |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10400.5/29503 | |
| dc.language.iso | eng | pt_PT |
| dc.publisher | Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina Veterinária | pt_PT |
| dc.relation | FCT IP (SAICT/2017/32085, PTDC/QUI-OUT/3989/2021 | pt_PT |
| dc.relation | Development of novel antibody-drug conjugated molecules for treatment of B-cell malignancies | |
| dc.relation | Centre for Interdisciplinary Research in Animal Health | |
| dc.relation | Associate Laboratory for Animal and Veterinary Sciences | |
| dc.subject | Single-domain antibodies | pt_PT |
| dc.subject | Lymphoma | pt_PT |
| dc.subject | Antibody-drug conjugates | pt_PT |
| dc.subject | Immunotoxins | pt_PT |
| dc.subject | Immunoliposomes | pt_PT |
| dc.subject | Anticorpos de pequeno domínio | pt_PT |
| dc.subject | Linfoma | pt_PT |
| dc.subject | Anticorpos conjugados a fármacos | pt_PT |
| dc.subject | Imunotoxinas | pt_PT |
| dc.subject | Imunolipossomas | pt_PT |
| dc.title | Development of novel antibody-drug conjugated molecules for treatment of B-cell maligancies | pt_PT |
| dc.type | doctoral thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| oaire.awardTitle | Development of novel antibody-drug conjugated molecules for treatment of B-cell malignancies | |
| oaire.awardTitle | Centre for Interdisciplinary Research in Animal Health | |
| oaire.awardTitle | Associate Laboratory for Animal and Veterinary Sciences | |
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| rcaap.embargofct | Proteção de propriedade industrial | pt_PT |
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| rcaap.type | doctoralThesis | pt_PT |
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