Publicação
O papel da LARP4 no sistema nervoso central : relação com a atrofia muscular espinal
| datacite.subject.fos | Ciências Médicas | pt_PT |
| dc.contributor.advisor | Carvalho, Margarida Henriques da Gama, 1972- | |
| dc.contributor.advisor | Sebastião, Ana Maria, 1958- | |
| dc.contributor.author | Silva, João Paulo de Sá e | |
| dc.date.accessioned | 2019-08-26T15:26:41Z | |
| dc.date.available | 2021-11-16T01:30:40Z | |
| dc.date.issued | 2018-11-16 | |
| dc.description | Tese de mestrado, Neurociências, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2018 | pt_PT |
| dc.description.abstract | Spinal Muscular Atrophy (SMA) is a severe neurodegenerative disease characterized by the degeneration of motor neurons located in the anterior horn of the spinal cord due to the deletion or mutation of the SMN1 gene and the decrease in SMN protein production. Its incidence is about 1:10,000 live births. LARP4 protein was identified as an RBP that binds to the 3'UTR region of the SMN1/2 gene. Its homolog of Drosophila melanogaster - CG11505 – was identified as a positive modifier of SMA phenotype in a genomic screen in a disease model. LARP4 protein shows a cytoplasmic distribution in the HEK293 and SK-N-Be(2)c cell lines; but in the SMA patient-derived fibroblast GM03813 cell line it shows a cytoplasmic and nuclear pattern, in a very close location with the Cajal Bodies. Functional studies with over-expression and knock-down of LARP4 have been performed, and increased expression of LARP4 protein has been shown to be related to increased expression of the endogenous Smn protein in the SK-N‑Be(2) cell line, while its decrease results in a decrease in SMN mRNA levels in HEK293 and SK-N-Be(2)c cell lines. The overexpression result was also observed in HEK293 cell line transfected with a vector containing the 3'UTR region of the SMN1/2 mRNA gene. In this way, it was possible to infer that the increase of LARP4 expression has a role in the regulation of the translation of the Smn protein and that the decrease of its expression leads to a decrease in mRNA levels, possibly due to a decrease in mRNA stability and degradation. In addition, the function of the CG11505 protein in the nervous system was analyzed in Drosophila melanogaster. We observed that the decrease of CG11505 protein expression results in the degeneration of retinal neurons. In this way, we propose that the LARP4 protein has a role in the regulation of SMN gene expression, potentially playing a relevant role in the specific context of the nervous system. | pt_PT |
| dc.description.abstract | A Atrofia Muscular Espinal (SMA) é uma doença neurodegenerativa severa caracterizada pela degeneração dos neurónios motores, localizados no corno anterior da medula espinal, devido à deleção ou mutação do gene SMN1 e à consequente diminuição da produção da proteína SMN. A sua incidência é de cerca de 1:10,000 nados vivos. A proteína LARP4 foi identificada como uma ‘RNA Binding Protein’ (RBP) que se liga à região 3´UTR do gene SMN1/2. Adicionalmente o seu gene homólogo em Drosophila melanogaster - CG11505 - foi identificado como modificador positivo do fenótipo neuromuscular num modelo de SMA. A proteína LARP4 apresenta uma distribuição citoplasmática nas Linhas celulares HEK293, SK-N-Be(2)c; mas na linha celular GM03813, derivada de Fibroblastos de um doente de SMA, apresenta um padrão citoplasmático e nuclear, numa localização muito próxima com os Corpos de Cajal. Foram realizados estudos funcionais de sobre e sub-expressão da LARP4, tendo-se verificado que o aumento da expressão da proteína está relacionada com o aumento dos níveis da proteína Smn endógena na linha celular SK-N-Be(2)c; e que a sua diminuição resulta numa diminuição dos níveis do mRNA do SMN nas linhas celulares HEK293 e SK-N-Be(2)c. O resultado de sobre-expressão foi igualmente observado na linha celular HEK293 transfetada com um vetor que contém a região 3´UTR do mRNA do gene SMN1/2. Desta forma foi possível inferir que o aumento da expressão da LARP4 tem um papel na regulação da tradução da proteína Smn e que a diminuição da sua Expressão leva à diminuição da abundancia do mRNA, possivelmente por diminuição da sua estabilidade e degradação. Para além disso, foi analisada a função da proteína CG11505 no sistema nervoso em Drosophila melanogaster, tendo-se observado que a diminuição da sua expressão resulta na degenerescência dos neurónios da retina. Desta forma, propõe-se que a proteína LARP4 tenha um papel na regulação da expressão do gene SMN, potencialmente assumindo um papel importante no contexto específico do sistema nervoso. | pt_PT |
| dc.identifier.tid | 202209555 | pt_PT |
| dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10451/39356 | |
| dc.language.iso | por | pt_PT |
| dc.subject | La-related protein 4 | pt_PT |
| dc.subject | Spinal muscular atrophy | pt_PT |
| dc.subject | Survival of motor neuron | pt_PT |
| dc.subject | RNA binding protein | pt_PT |
| dc.subject | Teses de mestrado - 2018 | pt_PT |
| dc.title | O papel da LARP4 no sistema nervoso central : relação com a atrofia muscular espinal | pt_PT |
| dc.type | master thesis | |
| dspace.entity.type | Publication | |
| rcaap.rights | openAccess | pt_PT |
| rcaap.type | masterThesis | pt_PT |
| thesis.degree.name | Mestrado em Neurociências | pt_PT |