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Projeto de investigação
Unveil the role of Limosilactobacillus D-lactate to treat NAFLD
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Disentangling the role of Limosilactobacillus reuteri D-lactate in lipid metabolism
Publication . Romero, Brian Nathan Saavedra; Santos, André Fernando Anastácio dos; Rodrigues, Cecília Maria Pereira
A doença de fígado gordo não alcoólico (do inglês NAFLD) compreende um amplo espectro de alterações hepáticas desde esteatose simples até carcinoma hepatocelular. Devido à globalização de uma dieta ocidentalizada, a NAFLD tornou-se a doença hepática crónica mais comum, tendo sido associada à disbiose da microbiota intestinal. Probióticos são bactérias com a capacidade de restaurar a homeostasia intestinal do hospedeiro, tendo o seu efeito benéfico já sido demonstrado no alívio da NAFLD. Recentemente mostrámos que ratinhos suplementados com Limosilactobacillus reuteri (L. reuteri) apresentam menor progressão da doença hepática num modelo de lesão hepática, em parte através da produção de D-lactato. Neste projeto, dada a capacidade de L. reuteri modular a doença hepática, prevemos que o metabolito D-lactato possa regular diretamente o metabolismo hepático, melhorando a patologia da NAFLD. Após confirmação de que o Lactato é o principal metabolito produzido por L. reuteri, determinámos a eficácia do D-lactato em modular o metabolismo lipídico e a inflamação em testes in vitro com linhas celulares de hepatócitos e macrófagos. Estas foram expostas a palmitato de sódio (PA) 125 µM na presença/ausência de 1 e 5 mM de D-lactato ou L-lactato (controlo). Uma vez que D- e L-lactato podem participar na mesma via metabólica, também silenciámos a expressão do gene D-lactato desidrogenase (D-ldh) nos hepatócitos e avaliámos os níveis de mRNA de genes relacionados com transporte de ácidos gordos (Cd36 e Cpt1), biossíntese de lipídios (Lxr, Srebp1c, Chrebp, Acc1, Fasn, Dgat2 e Pparγ), fissão e fusão mitocondrial (Fis1, Drp1, Mfn2 e Opa1) e inflamação (IL-8, Tnf-α, e Tgf-β). Nos hepatócitos tratados com PA, o D-lactato reduziu significativamente os níveis de expressão de mRNA de Cd36, Cpt1, Srebp1c, Dgat2 e Pparγ, bem como os níveis das proteínas CD36, CPT1, MFN2 e DRP1. Já nos macrófagos tratados com PA, o D-lactato afetou significativamente os níveis do mRNA de Pparγ. Por fim demonstrámos fenotipicamente que o D-lactato tem um efeito protetor contra a acumulação de lípidos nos hepatócitos. Assim, demonstrámos também que, o efeito protetor do D-lactato poderá estar relacionado com via de sinalização PDK4, colesterol e/ou o PPARγ. Desta forma, entender as vias metabólicas por trás da modulação do D-lactato na resposta de hepatócitos e macrófagos na acumulação de lípidos é essencial para desvendar o papel de L. reuteri na melhoria da NAFLD. Este trabalho expande o conhecimento sobre a forma como os metabolitos derivados da microbiota afetam a homeostasia metabólica do hospedeiro, destacando-se o papel do D-Lactato na regulação do metabolismo hepático, sugerindo novas abordagens terapêuticas.
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Contribuidores
Financiadores
Entidade financiadora
Fundação para a Ciência e a Tecnologia
Programa de financiamento
3599-PPCDT
Número da atribuição
EXPL/MED-OUT/0688/2021