Departamento de Sanidade Animal
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- Um caso típico de transfaunação intercontinental : o pardal-comum, Passer domesticus (Linnaeus, 1758) e o seu trematódeo, Paraurotocus fusiformis (McIntosh, 1935) Travassos & Kohn, 1966Publication . Varela, Manuel Carvalho; Silva, M. P. Cruz; Marcos, M. V. MA disseminação e transfaunação transcontinental e intercontinental de um hospedeiro e dos seus parasitas tem vindo a merecer a atenção crescente dos parasitologistas, devido ao incremento espectacular do comércio internacional de animais vivos, com as suas repercussões ecológicas na saúde animal e humana. O pardal-comum foi importado, talvez do por engano, em fins de 1903, de Portugal para o brasil, Rio de Janeiro, por via marítima
- Pesquisa e quantificação do agonista beta2-adrenérgico salbutamol (Albuterol) no plasma sanguíneoPublication . Correia, J.H.R.D.; Prates, J.A.M.A utilização de agonistas Beta2-adrenérgicos (por exemplo, clenbuterol, salbutamol, ractopamina, etc.) para fins ilegais, de aceleração do crescimento em animais de talho, é um gravíssimo problema da Saúde Pública Veterinária.
- Estudo sero-epidemiológico da infecção por Leishmania infantum em cães e gatos do município de Vila Franca de Xira (Ribatejo, Portugal) utilizando o teste de imunofluorescência indirectaPublication . Faria, Tânia Cristina Pereira; Afonso, Fernando Ribeiro Alves; Fonseca, Isabel Maria S. Pereira daA leishmaniose canina é uma zoonose, com importância crescente em saúde pública. Em Portugal, é provocada pelo protozoário Leishmania infantum e transmitida por um insecto do género Phlebotomus. Actualmente, os gatos são considerados novos hospedeiros reservatórios da doença. A amostra deste estudo foi constituída por dois grupos de animais (cães e gatos), um proveniente de uma clínica veterinária do município de Vila Franca de Xira e o outro de uma associação protectora local. Os objectivos foram: (i) determinar e comparar, com o recurso a IFAT, os valores de sero-prevalência de Leishmania nos dois grupos; (ii) efectuar um inquérito aos donos dos animais, para detectar possíveis factores de risco na transmissão da leishmaniose e avaliar o grau de conhecimento da doença; (iii) divulgar informação sobre a leishmaniose, através da distribuição de um panfleto no final da consulta. Através da IFAT detectou-se que 47,44% (37/78) dos cães da clínica tinham anticorpos anti-Leishmania enquanto que os cães do canil apresentaram 46,0% (23/50) de resultados positivos. Não foram detectados anticorpos em gatos. Na análise estatística não foram detectadas diferenças significativas entre os dois grupos de cães. Os resultados do inquérito mostraram que dentro dos factores de risco apreciados apenas a prevenção foi considerada significativa.
- Prevalência de Taenia saginata/ Cysticercus bovis na Região Autónoma da Madeira: estudo efectuado nos utentes dos Centros de Saúde do Faial, de Santo António da Serra e da Serra de Água, respectivamente, nos concelhos de Santana, de Machico e da Ribeira Brava e nos Centros de Abate da Região Autónoma da MadeiraPublication . Afonso, Mariana Boaventura Vela de Ornelas; Vilhena, Maria Manuela Clemente; Carvalho, Luís Manuel Madeira deCom este estudo pretende-se melhorar o conhecimento existente, na Região Autónoma da Madeira (RAM), sobre a epidemio-infecciologia de Taenia saginata. Os objectivos específicos foram: estimar a prevalência de T. saginata na população madeirense, recorrendo à pesquisa de ovos por microscopia e à pesquisa de antigénio nas fezes; identificar possíveis focos de infecção para o ser humano e para os bovinos relacionando os resultados parasitológicos humanos com os achados em matadouro, por área geográfica; relacionar a presença de Cysticercus bovis nas carcaças com as movimentações efectuadas pelos animais. Para a prossecução do primeiro objectivo, projectámos um conjunto de acções junto dos utentes do Centro de Saúde do Faial, do C. S. de Santo António da Serra e do C. S. da Serra de Água, as quais, releva-se, mereceram uma adesão de 76,22%. Foram efectuadas análises coprológicas pela Técnica de Ritchie a 509 utentes não tendo sido encontrados ovos de Taenia spp. Por razões de carácter logístico, não foi possível realizar a pesquisa de coproantigénio. Num levantamento retrospectivo de casos de Taenia spp. detectados pelo laboratório do Serviço Regional de Saúde, E.P.E. (2000-2006) temos a assinalar 48 casos na RAM, das quais 20,83% ocorreram em habitantes do concelho de São Vicente, 18,75% em habitantes do concelho do Funchal, 16,67% em habitantes do concelho de Santana e distribuindo-se os restantes 43,75% pelos outros concelhos. A par, desenvolveu-se um levantamento dos arquivos da inspecção sanitária em bovinos abatidos na RAM, abrangendo os anos de 2005 e 2006. Neste período foram abatidos 16 316 bovinos e detectados 825 casos de C. bovis (prevalência=5,06%), que deram origem a 93 rejeições totais e 732 parciais (órgãos e/ou massas musculares). A análise destes casos em relação ao local de nascimento e o momento presumível em que ocorreu a infecção dos animais corrobora a existência de C. bovis na RAM bem como na população bovina oriunda da Região Autónoma dos Açores (RAA). A contaminação dos bovinos na RAM aparenta estar relacionada com a inexistência de instalações sanitárias disponíveis aquando do desenvolvimento de actividades ao ar livre, a não disponibilização de rede de saneamento básico a toda a população, à existência de tratadores parasitados, e ao acesso dos bovinos a comida e água contaminadas com ovos de T. saginata. Assim sendo, conclui-se que urge serem tomadas medidas coordenadas pelas entidades responsáveis de Saúde Pública, de ambas as Regiões Autónomas, de forma a combater e eliminar esta zoonose, envolvendo os meios e as populações neste desiderato.
- Estudo transversal das doenças abortivas de origem bacteriana no sistema de produção de bovinos leiteiros do concelho de Nordeste, São Miguel, AçoresPublication . Lima, Rui Daniel Ferreira; Vaz, Yolanda MariaO concelho de Nordeste, Ilha de S. Miguel - Açores, tem como principal actividade económica a pecuária de bovinos. Informações do Centro de Saúde de Nordeste indicavam que em 2005 as zoonoses registadas naquele concelho foram a brucelose e a leptospirose, podendo ambas ser transmitidas ao Homem a partir de bovinos infectados e de produtos de origem animal, nomeadamente, leite e lacticínios, entre outras fontes. Definiram-se como principais objectivos deste estudo a determinação da seroprevalência de algumas zoonoses de origem bacteriana responsáveis por abortos em vacas (brucelose, leptospirose e clamidiose) nas explorações agrícolas leiteiras do concelho e o estudo das características do sistema de produção que possam favorecer a sua disseminação e manutenção. Foram colhidos soros de 118 explorações leiteiras, seleccionadas aleatoriamente de uma forma proporcional ao número de efectivos existentes em 3 classes de tamanho, entre Novembro de 2006 e Maio de 2007. Para a brucelose (B. abortus), o método de diagnóstico usado foram os testes oficiais do Rosa de Bengala e da Fixação de Complemento. A seroprevalência das explorações foi de 0,85% (1/118) (IC95% de >0 a 2,16%), e a animal foi de 0,18% (4/2252) (IC95% de 0,05 a 0,31%). Para a leptospirose, as 2153 amostras de soro de vacas não vacinadas foram testadas pelo método do Teste de Micro Aglutinação (TAM) na diluição mínima de 1:100, e 393 foram positivas (18,3%; IC95% 17,7 a 19,5%). A prevalência de explorações seropositivas foi de 61,1% (IC95% de 53,1 a 68,0%). Foram testados 13 serovares, e identificados 9, mas não foi possível fazer o estudo da seroprevalência do serovar Hardjo, por este requerer diluições mais baixas, embora fosse suspeito de estar presente em infecção endémica. O serogrupo Sejroe foi o mais importante por apresentar a seguinte seroprevalência de serovares: Saxkoebing 67,9% e Wolffi 0,5%. O segundo serogrupo mais frequente foi o Icterohaemorrhagiae com os serovares Icterohaemorrhagiae, 14,8% e Copenhageni, 8,4%. Depois foram os serogrupos: Autumnalis (serovar Autumnalis 7,1%); Ballum (serovar Arborea 7,1%); Australis (serovar Bratislava 5,6%); Tarassovi (serovar Tarassovi 1,8%) e Canicola (serovar Canicola 1,8%). A coaglutinação com associação de L. ballum arborea e L. autumnalis autumnalis foi a que apresentou maior frequência, seguida da associação L. icterohaemorrhagiae icterohaemorrhagiae e L. icterohaemorrhagiae copenhageni. Para a clamidiose, foi usado o método de ELISA indireto para a pesquisa de anticorpos da Chlamydophila abortus e a seroprevalência das explorações foi de 82,9% (IC95% de 76,7 a 89,1%) e a animal foi de 14,0% (IC95% de 12,9 a 15,1%). O estudo do sistema de produção evidenciou práticas de maneio estatísticamente associados à presença de animais seropositivos. Para a leptospirose foram: manadas conjuntas (OR 3,8), épocas de parto superiores a 9 meses (OR 4,8), compra de fêmeas (OR 3,2), quer a outros produtores (OR 2,5), quer a impérios (OR 6,3). Para a clamidiose, foi: época de partos superior a 9 meses (OR 3,4). O problema de aborto em vacas secas sugeriu estatisticamente associado à leptospirose (OR 4,4), e à clamidiose surgiram associados os problemas de metrites (OR 10,3) e de mastites (OR 6,1). São avançadas recomendações para o controlo destas doenças e para a protecção da saúde pública, no concelho do Norteste.
- Leishmaniose visceral humana e canina no município de Imperatriz, Maranhão, BrasilPublication . Castro, Giovana Nogueira de; Gonçalves, Vítor Salvador Picão; Louzã, Armando CarvalhoA leishmaniose visceral foi notificada pela primeira vez em Imperatriz em 1991. A partir de então, casos humanos e caninos da doença têm sido sistematicamente notificados, sendo a espécie Lutzomyia longipalpis o vetor apontado como transmissor da enfermidade. De Janeiro de 2000 a Dezembro de 2005, foram registrados 752 casos humanos autóctones, predominando o sexo masculino, que representou 57% do total de ocorrências. As crianças na faixa etária de 0 a 9 anos representaram 61% dos casos no período. A incidência de casos humanos aumentou a partir de 1998, atingindo um pico de 226 casos em 2002 e vem decrescendo desde então, provavelmente como resultado da intensificação das ações de controle. A letalidade no período foi de 4,8%. Mais de 99% dos enfermos procediam da zona urbana. No mesmo período, 1214 cães foram eutanasiados por serem positivos ao RIFI (1:40) para leishmaniose visceral. As condições socioeconômicas e ambientais encontradas no município assemelham-se às anteriormente descritas por vários autores para a ocorrência e manutenção da doença, podendo destacar-se a intensa migração da população, a degradação ambiental resultante da invasão do homem ao ecótopo do vetor, a abundância do agente transmissor e a grande exposição das populações a este, acompanhadas de insuficientes condições sanitárias em zona urbana e a da manutenção do reservatório canino positivo na área do município.
- Contribuição para o estudo de mecanismos de apoptose em infecção de vírus da peste suína africana (VPSA) em macrófagos de suínoPublication . Portugal, Maria Raquel Seiça; Martins, Carlos Manuel Lopes VieiraA modulação de apoptose em macrófagos de suíno foi estudada durante infecção in vitro pelos isolados de vírus da peste suína africana (VPSA) L60, de alta virulência, e NHV, de baixa virulência. Ambos desencadearam apoptose mas morte celular expressiva observou-se apenas tardiamente, após conclusão do ciclo viral. Na infecção por L60 identificou-se menor fragmentação internucleossómica (FIN) de DNA a tempo precoce e menor activação de caspase-3 durante 18h de infecção. Em correlação, quantificou-se maior expressão de mRNA do gene viral homólogo de bcl-2 muito precocemente após infecção por L60 e maior produção de proteína viral homóloga de IAPs ao longo desta, em comparação com NHV. Contudo, a tempo tardio (18h) a FIN de DNA foi semelhante em ambas infecções. A inibição de caspases por zVAD-fmk não preveniu significativamente a FIN, sugerindo independência daquelas proteases no processo apoptótico desencadeado pelo VPSA. Apesar da diferente modulação de apoptose, ambos os vírus produziram progenia semelhante após 18h de infecção, sugerindo exigências particulares de cada isolado para completar o seu ciclo de replicação in vitro. O estudo do significado in vivo das diferenças na modulação de apoptose por L60 e NHV poderá contribuir para a melhor compreensão da patogenia de infecção pelo VPSA.
- Rastreio serológico de Febre Q em ovinos no concelho Montemor-o-NovoPublication . Fernandes, Ana Catarina Batista; Vilela, Ana Cristina Gaspar Nunes LoboFoi realizado um rastreio para determinar a seroprevalência do agente da Febre Q, Coxiella burnetii, nos rebanhos de ovinos do concelho de Montemor-o-Novo, de forma a: i) calcular prevalência de explorações positivas; ii) a prevalência animal por exploração. Foi seleccionada uma amostra aleatória de 35 explorações, num total de 726 animais, aos quais foram recolhidas amostras de sangue para serem analisadas através de um teste de ELISA comercial para detecção de anticorpos anti C. burnetii em fase I e fase 11.Foram identificadas 20 explorações (57,1%) com pelo menos um animal positivo. A prevalência intra-exploração variou entre 3% ei50%. Os estudos epidemiológicos e a investigação sobre surtos ocorridos nos últimos anos em vários países da Europa mostram que a Febre Q deve ser considerada um problema de saúde pública crescente, sendo os ruminantes identificados como a principal fonte de infecção para o Homem. o conhecimento desta zoonose através de estudos seroepidemiológicos é um passo inicial importante para o seu controlo em Portugal, uma vez que a existência de casos humanos indica a presença do agente no nosso País, mas são escassos os dados relativos à sua ocorrência em espécies animais.
- Um novo sistema de clonagem baseado na lipoproteína OprI para obtenção de formulações imunogénicas derivadas da parede celular bacterianaPublication . Basto, Afonso Silva Pinto; Leitão, José Alexandre da Costa Perdigão e Cameira; Martins, Carlos Manuel Lopes VieiraA modulação de imunidade específica por conjugação de antigénios com ligandos de receptores de reconhecimento de padrão (PRR) constitui uma estratégia emergente para o desenvolvimento de vacinas subunitárias. Neste trabalho, desenvolve-se um novo sistema de clonagem em Escherichia coli para expressão de antigénios em fusão com a lipoproteína OprI, um ligando TLR da membrana externa de Pseudomonas aeruginosa. O sistema permite um controlo apertado da expressão proteica e a purificação por cromatografia de afinidade com iões metálicos, ultrapassando as principais limitações de versões anteriores. Confirmou-se o processamento, translocação e triacilação da lipoproteína e desenvolveram-se protocolos para a produção de outras formulações recombinantes derivadas da parede bacteriana (fragmentos e vesículas de membrana externa) com potencial distinto para activação PRR. Como modelo, clonaram-se as sequências dos antigénios A104R do vírus da peste suína africana (VPSA), ovalbumina e EGFP. Demonstrou-se a capacidade adjuvante das três formulações, avaliando a resposta humoral e a indução de linfócitos T CD8+ in vivo e o perfil de citocinas e quimiocinas induzidas em células dendríticas estimuladas in vitro. Os resultados observados validam o sistema para a obtenção de formulações imunogénicas com aplicação no desenvolvimento de vacinas subunitárias experimentais e em estudos de modulação de resposta adaptativa.
- Bovine mastitis due to coagulase-negative staphylococci and the role of minor pathogens on mastitisPublication . Bexiga, José Ricardo Dias; Vilela, Ana Cristina Gaspar Nunes Lobo; Ellis, Kathryn AmandaBovine mastitis is the most common disease of dairy cows. To implement efficient control measures, it is generally necessary to diagnose the relevant aetiologic agents. Coagulasenegative staphylococci (CNS) and Corynebacterium spp. are considered minor mastitis pathogens because of the mild impact they have on udder health. Despite that, they are the most common agents isolated from milk samples in several large scale surveys worldwide. The objectives of this study were to evaluate if there were differences in pathogenicity between individual CNS species, to evaluate if alternative sampling or diagnostic techniques could more accurately determine in which cases the aforementioned minor pathogens were responsible for mastitis, and to determine if treatment of CNS infected quarters was a costeffective control measure. We followed 111 intramammary infections due to CNS for up to 48 weeks in four commercial dairy farms. Duration of infection had a mean of 188 days and was not significantly different between CNS species; geometric mean quarter somatic cell count (SCC) overall was 132,000 cells/ml and was also not significantly different between CNS species. There were differences in diversity between CNS species, with Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus simulans showing less diversity than Staphylococcus haemolyticus, the epidemiological significance of which is debated. Freezing milk samples overnight at -20ºC did not increase detection of intramammary bacteria in milk samples. Use of a real-time PCR-based test allowed for detection of udder pathogens beyond the ones identified using conventional bacteriology in milk samples with a high SCC that were culture negative or that yielded CNS or Corynebacterium bovis shown by conventional bacteriology. Single quarter milk samples were collected in duplicate from 132 dairy cows in a commercial dairy farm, with the standard technique and by use of a cannula surpassing the teat canal. There was a significant difference between the two sampling techniques for recovery of Corynebacterium spp. and for culture-negative samples. The observed difference could not be attributed to a particular sampling order and no significant change was observed in quarter SCC between the sampling day and seven days later, indicating iatrogenic IMI following use of the alternative technique was not an issue. Use of a deterministic economic model allowed to determine that in most situations lactational treatment of subclinical mastitis due to CNS would result in a net financial loss, on average of €38.74 per treated quarter. Taken together, these results indicate that CNS have a low impact in terms of udder health, with little differences between individual species. Treating CNS subclinical mastitis during the lactation is not cost-efficient and should therefore not be advised. Using a RTPCR and sampling with a teat cannula might improve diagnosis of mastitis etiology.