Reis, Ana Catarina Beco PintoGaspar, Maria Manuela de Jesus GuilhermeSilvério, Inês Torres Pereira2022-05-162024-10-262021-09-202021-09-02http://hdl.handle.net/10451/52999Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, 2021, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A nanomedicina trouxe novas e melhorou técnicas de diagnóstico e terapias, e, concomitantemente, novos desafios. Tal como os medicamentos ditos convencionais, a segurança é um parâmetro crucial para avaliar minuciosamente, no entanto, devido à dimensão e versatilidade dos nanoprodutos, a avaliação da sua toxicidade é complexa. Devido à novidade desta área, não existe um procedimento standard de avaliação da segurança, fazendo com que os investigadores adaptem as normas de orientação existentes da medicina convencional. O nosso grupo desenvolveu formulações com nanopartículas de ouro destinadas a serem utilizadas em tumores superficiais como potenciadores da fototerapia térmica, tendo mostrado resultados promissores. Neste trabalho, pretende-se melhorar o conhecimento sobre a segurança das nanopartículas de ouro não revestidas e revestidas, com material polimérico-lípido. Foi realizado um conjunto de ensaios in vitro; a biocompatibilidade foi testada através de actividade hemolítica, citotoxicidade por MTT em células B16F10 e taxa de mortalidade no bioensaio da Artemia salina. Os resultados, no geral, mostram efeitos tóxicos e biocompatibilidade reduzida na formulação com revestimento. Um teste preliminar de toxicidade aguda in vivo foi realizado em murganhos CD-1 utilizando as concentrações mais elevadas testadas nos ensaios in vitro, 0.179 e 0.358 mg/mL. Não foram observadas alterações significativas relativamente ao comportamento e a histopatologia dos grupos testados, no entanto, ocorreu uma morte no grupo injectado com nanopartículas de ouro revestidas a uma concentração equivalente a 0.358 mg/mL, fazendo uma dosagem de 28.6 mg/kg por peso corporal. Tendo em conta que a análise histopatológica de cada grupo não mostrou sinais significativos de toxicidade, pensamos que um aglomerado pode ter sido a causa da morte do murganho. Em resumo, os resultados obtidos fazem reconsiderar o uso de revestimento de material polimérico-lípido ou que é necessária alguma optimização para assegurar uma formulação eficaz e segura.Nanomedicine has brought new and improved therapeutic strategies and diagnostic techniques, and along with new challenges. Like conventional medicines, safety is a crucial parameter to thoroughly evaluate, however, the size and versatility of nanoproducts turn the assessment of their toxicity complex. Due to the novelty of this field, there is not a standardized safety assessment procedure; and so, researchers adapt existing guidelines of conventional medicines. Our group has developed formulations with gold nanoparticles meant to be used in superficial tumours as enhancers of photothermal therapy. The obtained in vitro and in vivo results showed high potential towards several tumours. This work is intended to improve the knowledge about the safety of uncoated and coated, with polymeric-lipid material, gold nanoparticles. A set of in vitro assays was performed. The biocompatibility was tested through haemolytic activity, cytotoxicity by MTT in B16F10 cells and mortality rate in Artemia salina bioassay. The overall results showed toxic effects in the presence of the murine melanoma cell line, B16F10, and reduced biocompatibility for the coated formulation. A preliminary in vivo acute toxicity test was performed in CD-1 mice using the highest concentrations tested in the in vitro assays, 0.179 and 0.358 mg/mL. No significant alterations were observed regarding behaviour and histopathology of the tested groups, however, one casualty happened in the group injected with coated gold nanoparticles at the equivalent concentration of 0.358 mg/mL, making dosage of 28.6 mg/kg of body weight. Bearing in mind that the histopathological analysis of all animal groups showed no significant signs of toxicity, we think that an agglomerate might have been the cause of mouse death. Ultimately, the results obtained make us rethink the use of polymeric-lipid material coating or that some optimization is needed to ensure the design of an effective and safe formulation.engToxicologyNanomedicineNanotoxicologyGold nanoparticlesCancerMestrado integrado - 2021master thesis202985628