Cardoso, Maria LuísRivera, Isabel Maria Antolin Martins de Carvalho CrocePereira, Ana Sofia Sequeira2023-07-072023-07-072022-12-272022-12-02http://hdl.handle.net/10451/58527Tese de mestrado, Ciências Biofarmacêuticas, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A identificação e caracterização de polimorfismos genéticos em genes envolvidos na farmacocinética e/ou na farmacodinâmica pode proporcionar um conhecimento profundo sobre as diferenças inter-individuais na resposta aos fármacos, permitindo otimizar a seleção dos medicamentos e o ajuste da dose, para uma melhoria da eficácia do tratamento e minimizando a ocorrência de reações adversas. Neste estudo, recorremos a várias metodologias (MLPA; PCR-longo e sequenciação de Sanger) para detetar variantes nos genes CYP2C19 e CYP2D6, caracterizar o seu genótipo e inferir o fenótipo num grupo de indivíduos portugueses com terapia antidepressiva e/ou antipsicótica. Estes dois genes codificam para enzimas importantes no metabolismo dos referidos fármacos. O estudo do gene CYP2C19 revelou 44,64% de metabolizadores normais, 4,46% metabolizadores ultra-rápidos, 27,68% metabolizadores rápidos, 22,32% metabolizado-res intermédios e cerca de 1% de metabolizadores lentos. Relativamente ao CYP2D6, o estudo revelou que 55,36% da população em estudo são metabolizadores normais, 12,50% são metabolizadores intermédios, cerca de 1% são metabolizadores lentos e igual percentagem são metabolizadores ultra-rápidos. Em 30,36% da população em estudo, não foi possível determinar o fenótipo. Daqui se infere que pelo menos 7% da população apresentam fenótipos extremos que implicariam optar, caso se dispusesse dos dados de farmacogenética antes do início do tratamento, por uma medicação alternativa cujas vias de destoxificação não envolvessem os genes em estudo; além disso, em mais de 50% da população estudada haveria espaço para melhoria da terapêutica com base no ajuste da dose. Permanecem dificuldades em caracterizar certos haplótipos e híbridos mais complexos com as metodologias de genética molecular mais comuns, sendo a sequenciação por nanoporo uma abordagem com potencial de solucionar o problema visto permitir, numa só corrida, fazer sequenciar, identificar variantes pontuais, e rearranjos de elevada complexidade e simultaneamente haplotipar.The identification and characterization of genetic polymorphisms in genes involved in pharmacokinetics and/or pharmacodynamics can provide in-depth knowledge about inter-individual differences in response to drugs, allowing optimization of drug selection and dose adjustment, for improvement on treatment efficacy and minimizing adverse drug reactions. In this study, we used several methodologies (MLPA; long-PCR and Sanger sequencing) to detect variants in CYP2C19 and CYP2D6 genes, to characterize their genotype and infer the phenotype in a group of Portuguese patients on antidepressant and/or antipsychotic therapy. These genes code for important enzymes involved in the metabolism of these drugs. The CYP2C19 gene study revealed 44.64% normal metabolizers, 4.46% ultra-rapid metabolizers, 27.68% rapid metabolizers, 22.32% intermediate metabolizers and about 1% of poor metabolizers. For CYP2D6, the study revealed that 55.36% of the individuals are normal metabolizers, 12.50% are intermediate metabolizers, about 1% are poor metabolizers and an equal percentage are ultra-rapid metabolizers. In 30.36% of the study population, the phenotype could not be determined. This suggests that at least 7% of the population have extreme phenotypes that would require, if pharmacogenetic data were available preemptively, an alternative medication whose detoxification pathways do not involve these two genes. Further, in more than 50% of the studied population there would be opportunity for therapeutic improvement based on dose adjustment. Difficulties remain in the characterization of more complex haplotypes and hybrids with common molecular genetic methodologies, therefore nanopore sequencing is an approach that has the potential to solve this problem, as it allows, in a single run, sequencing, identification of variants, and highly complex rearrangements, as well as haplotyping.engGenotypingPharmacogenomicsCYP2D6CYP2C19Neuropsychiatric drugsTeses de mestrado - 2022master thesis203207394