Brochot, EtiennePereira, José Miguel A.Oliveira, Catarina Alexandra Grilo de2017-11-032017-11-0320132013http://hdl.handle.net/10451/29589Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2013Hepatitis C is a liver disease that results from an infection by the Hepatitis C virus. It can range between severe to moderate illness, with variable time. Today, the most infected people are associate with drugs and injectable material. Until 1992, an individual was mostly infected by blood transfusions or organ transplants. This work reflects, therefore, the attempt to develop different strategies to the detailed study of hepatitis C virus, using a novel cellular strategy. The aim of the study is to obtain the iPSCs from fibroblasts by infected patients with the virus. Subsequently, it will be made differentiate into hepatocytes like cells. This development happens through progressive steps of cellular manipulation with many different conditions, culture mediums and techniques. Then, these cells are used to viral broader study, with results that mimic liver human conditions. In parallel, it was also tested forty five plasma samples from infected patients to comparing infection levels of different HCV genotypes as well as the response to drug therapy. The results were satisfactory once it was accomplished iPSC production, and it was possible to obtain conclusions with the RNA analysis.A hepatite c é uma doença hepática resultante da infeção provocada pelo vírus da hepatite c. A doença pode variar de severa a ligeira, com duração diversa. Atualmente, a maioria dos indivíduos infetados estão associados ao contacto com drogas e material injetável. Até 1992, um indivíduo era maioritariamente infetado através de transfusões sanguíneas ou transplantes de órgãos. Este trabalho, reflete, por isso, a tentativa de desenvolver diferentes estratégias para o estudo pormenorizado do vírus da Hepatite C, recorrendo a uma estratégia celular inovadora. O estudo pretende obter o desenvolvimento de células iPSC a partir de fibroblastos de pacientes infetados com o vírus. Posteriormente será efetuada a sua diferenciação em hepatocytes like cells. Este desenvolvimento dá-se através de etapas progressivas de manipulação celular, com auxílio de diversas condições, meios de cultura e técnicas. Estas células são depois usadas para um estudo viral mais amplo, com resultados que mimetizam as condições hepáticas humanas. Em paralelo foi também testado o plasma de quarenta e cinco doentes infetados, com o objetivo de comparar níveis de infeção a partir de diferentes genótipos de HCV, assim como a resposta ao tratamento farmacológico. Os resultados foram satisfatórios uma vez ter sido conseguida a obtenção de iPSC, assim como foi possível tirar conclusões em relação às análises de RNA efetuadas.engiPSCHCVReprogrammingViral RNAMestrado Integrado - 2013master thesis