Ferreira, Maria José UmbelinoDuarte, Noélia Maria da Silva DiasSilva, Jorge Miguel Carvalho Sousa e2018-09-042018-09-042015-12-152015-11-16http://hdl.handle.net/10451/34743Tese de mestrado, Química Farmacêutica e Terapêutica, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2015Este trabalho teve como principal objetivo a obtenção de novos compostos com atividade biológica, nomeadamente atividade antiproliferativa, a partir de plantas medicinais Africanas. Para tal seguiram-se duas abordagens diferentes: i) estudo fitoquímico de algumas frações do extrato metanólico de Zanthoxylum capense (Rutaceae); ii) derivatização do policarpol (3), um triterpeno tetracíclico isolado anteriormente, em grandes quantidades, de Cleistochlamys kirkii (Annonaceae). O fracionamento do extrato metanólico das raízes de Z. capense foi efetuado através de várias técnicas cromatográficas, nomeadamente cromatografia em coluna, cromatografia em camada fina e cromatografia líquida de alta eficiência. Foram isolados e caracterizados nove compostos, nomeadamente dois fenilpropanoides, um dos quais é um composto novo designado por capensato (2.5.1) e a integrifoliolina (2.5.2), quatro alcaloides benzofenantridínicos, a tridecanoqueleritina (2.2.1), a 6-acetonildi-hidroqueleritrina (2.2.2), a arnotianamida (2.2.3) e a norqueleritrina (2.2.4), um triterpeno pentacíclico, o lupeol (2.3.1) e dois linhanos do tipo furofurano, a (−)-episesamina (2.4.1) e a (−)-sesamina (2.4.2). Adicionalmente, preparou-se um pequeno grupo de compostos a partir do policarpol (3). A derivatização molecular deste composto incluiu a manipulação dos grupos hidroxilo em C-3 e C-15, através de reações de esterificação com anidrido acético e diferentes cloretos de acilo, obtendo-se cinco compostos diacilados (3.1 – 3.5). A reação de oxidação dos grupos hidroxilo do policarpol (3) originou um novo composto com grupos cetona em C-3 e C-15 (3.6). O composto 3.6 reagiu posteriormente com a hidroxilamina originando uma oxima em C-3 (3.7) que por sua vez foi esterificada dando origem a três novos derivados monoacilados (3.8 – 3.10). As estruturas químicas dos compostos foram estabelecidas com base nos seus dados físicos e espectroscópicos (IV, espectrometria de massa, RMN unidimensional – 1H, 13C e DEPT e bidimensional –1H-1H-COSY, HSQC e HMBC). Para avaliar a capacidade antiproliferativa dos compostos, foram realizados ensaios preliminares em células do carcinoma do colon humano (HT-29) pelo método de redução do tetrazólio (MTT). A (−)-sesamina (2.4.2) foi o composto que apresentou maior atividade antiproliferativa, com 82% de perda de viabilidade celular, seguindo-se o alcaloide benzofenantridínico arnotianamida (2.2.3), com 69%. A (−)-episesamina (2.4.1), apenas com diferenças estereoquímicas em relação à (−)-sesamina (2.4.2), não apresentou atividade significativa na concentração testada. O policarpol (3) apresentou uma atividade moderada provocando 59% de perda de viabilidade celular. Os derivados 3.1, 3.7 e 3.8 apresentaram apenas um ligeiro aumento da atividade em relação ao policarpol (3). A substituição dos grupos hidroxilo do policarpol (3) por grupos cetona (3.6) levou à perda de atividade, sugerindo a importância do grupo OH na molécula.This work aimed to obtain new bioactive compounds, in particular with antiproliferative activity, from African medicinal plants. To achieve this goal, two different approaches were followed: i) phytochemical study of some fractions from the methanol extract of Zanthoxylum capense (Rutaceae); ii) derivatization of polycarpol, a tetracyclic triterpene previously isolated in large amounts from Cleistochlamys kirkii (Annonaceae). The fractionation of the methanolic extract of the roots of Z. capense was carried out using several chromatography techniques, namely column chromatography, thin layer chromatography and high-performance liquid chromatography. Nine compounds were isolated and characterized, namely two phenylpropanoids, a new compound named capensato (2.5.1) and integrifoliolin (2.5.2), four benzophenanthridine alkaloids, tridecanochelerythrine (2.2.1), 6-acetonyldihydrochelerythrine (2.2.2), arnotianamide (2.2.3) and norchelerytrine (2.2.4), a pentacyclic triterpene, lupeol (2.3.1), and two furofuran-type lignans, (−)-episesamin (2.4.1) and (−)-sesamin (2.4.2). Additionally, a small library of derivatives from polycarpol was generated (3). This molecular derivatization included manipulation of the hydroxyl groups at C-3 and C-15 through esterification, with acetic anhydride and different acyl chlorides, to give five diacylated compounds (3.1-3.5). Oxidation of the hydroxyl groups of polycarpol (3) yielded a new compound with two ketone groups (3.6). Furthermore, reaction of compound 3.6 with hydroxylamine gave rise to an oxime at C-3 (3.7), which in turn was acylated, yielding three new derivatives (3.8-3.10). The chemical structures of the compounds were established on the basis of their physical and spectroscopic data (IR, mass spectrometry, NMR unidimensional - 1H, 13C and DEPT and two-dimensional 1H-1H COSY, HSQC and HMBC). To evaluate the antiproliferative ability of the compounds, preliminary tests were carried out on the colon carcinoma human HT-29 cell line by the tetrazolium reduction method (MTT). (−)-Sesamin was the compound that showed higher activity, with 82% loss of cell viability followed by the benzophenanthridine alkaloid arnotianamide (2.2.3), with 69%. (−)-Episesamin (2.4.1), with only stereochemical differences from (−)-sesamin (2.4.2), showed no significant activity at the concentration tested. Polycarpol (3) exhibited a moderate activity causing 59% loss of cell viability. Derivatives 3.1, 3.7 and 3.8 presented only a slight increase in activity compared to polycarpol (3). The substitution of the hydroxyl groups of polycarpol (3) for ketone groups (3.6) led to loss of activity, suggesting the importance of the OH group in the molecule.porZanthoxylum capenseCleistochamys kirkiiRutaceaeAnnonaceaePolicarpolTeses de mestrado - 2015master thesis201251442