Custódio, Noélia Maria FernandesRodrigues, Cecília Maria PereiraGonçalves, Carolina Lopes2024-03-052022-12-122022-09-29http://hdl.handle.net/10451/63182Tese de mestrado, Ciências Biofarmacêuticas, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.O cancro do pâncreas é uma doença agressiva com uma taxa de sobrevivência de 5 anos de apenas 10%. O adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) é o tipo de cancro pancreático mais comum. Os regimes de combinação FOLFIRINOX e gemcitabina com nab-paclitaxel são os padrões para terapia sistémica em PDAC, porém estão associados a uma baixa taxa de resposta, existindo uma necessidade urgente de desenvolver novas terapias. A única terapia de precisão disponível é o inibidor de PARP olaparib, aprovado para o tratamento de doentes com mutações BRCA germinais. Porém, poucos doentes beneficiam deste tratamento devido à baixa prevalência destas mutações. Recentemente, foi demonstrado que a inibição de CDK12/CDK13 com SR-4835 sensibiliza células de cancro da mama triplo negativo sem mutações BRCA a inibidores de PARP. Perante estes resultados, colocámos a hipótese de que a inibição de CDK12/CDK13 com SR-4835 sensibiliza organoides derivados de doentes com PDAC ao olaparib, independentemente da presença de mutações BRCA. Organoides são estruturas tridimensionais derivadas de tecidos primários, utilizados como modelo de estudo devido à sua capacidade de preservar as características do tecido original e ao seu potencial de prever a resposta a tratamento em PDAC. Neste projeto, múltiplas linhas de organoides foram estabelecidas com sucesso a partir de amostras de PDAC e do ducto pancreático, obtidas através de ressecção cirúrgica e biópsia por agulha fina. Os organoides foram caracterizados por imunofluorescência. Foi verificada uma correlação entre a resposta de organoides e do paciente a terapias convencionais. Os organoides apresentaram diferentes sensibilidades à carboplatina e ao olaparib mas responderam ao tratamento com SR- 4835. Não foram encontradas mutações BRCA numa amostra de tumor cujos organoides correspondentes responderam ao olaparib. A combinação de olaparib com SR-4835 sensibilizou todos os organoides à inibição de PARP e um efeito sinérgico entre os dois componentes verificou-se em todos os casos. Os dados obtidos pelos ensaios de sequenciação a decorrer irão permitir o estudo do impacto da inibição de CDK12/CDK13 em células de PDAC e do mecanismo responsável pelo efeito sinérgico observado entre SR-4835 e olaparib. Os resultados deste projeto podem contribuir para melhorar o prognóstico desfavorável de PDAC por permitirem tratamento com olaparib numa gama de pacientes mais vasta, independentemente da presença de mutações BRCA.engPancreatic cancerPancreatic ductal adenocarcinomaOrganoidsCDK12/CDK13 inhibitionPARP inhibitionTeses de mestrado - 2022master thesis203207432