Síntese de inibidores e a sua influência na resistência adesiva de uma estratégia adesiva

Abstract

Objetivo: Desenvolver e sintetizar novos inibidores de metaloproteinases (iMMPs) associados à estratégia adesiva etch-and-rinse. Avaliar a sua viabilidade celular e resistência adesiva à dentina, aos seis meses. Materiais e Métodos: Depois da síntese iMMPs (K8, K12, K16) e da sua análise da inibição enzimática, o grau de conversão do monómero foi calculado analisando os espectros de Fourier Transform Near-Infrared Spectroscopy (FTIR), a sua solubilidade foi calculada utilizando o software ACD/Percepta (ACD/Labs algorithms model). A citotoxicidade foi medida por ensaio de MTT em duas linhas celulares NIH 3T3 e MG-63. Os ensaios de resistência adesiva foram feitos por microtração (μTBS) e baseados nas normas ISO/TS 11405:2015. Trinta molares hígidos foram aleatoriamente dividos em seis grupos (n=5) e testados às vinte e quatro horas e aos seis meses: OPT FL (Optibond FL- Kerr Corporation, Orange, CA, USA); K8 (Optibond FL+ K8); K12 (Optibond FL + K12); K16 (Optibond FL + K16); CHX0,2 (Optibond FL + CHX 0,2%) e CHX 2 (Optibond FL + CHX 2%). Os dados foram analisados com ANOVA de medidas repetidas (a=0,05), e fez-se caracterização da analíse ultramorofologica de todos os dentes. Resultados: O inibidor K12 mostrou ter a maior inibição enzimática estatisticamente significativa. O grau de conversão do monómero apresentou tendência para uma diminuição relativamente ao OPT FLcom excepção do K8. Os inibidores não são tóxicos na concentração de 20 μl. Os testes de μTBS não apresentam diferenças significativas (p>0,05) quando comparados com o grupo de controlo OPT FL. A associação do inibidor K12 e CHX a 0,2% ao sistema adesivo parece manter a camada híbrida mais estável morfologicamente passados seis meses. Conclusões: A associação de inibidores de MMPs na estratégia adesiva não demonstra ser vantajosa em termos de resistência adesiva após seis meses, embora o seja na análise ultramorfológica.

Purpose: To evaluate enzymatic inhibition, cytotoxicity, degree of conversion (%DC), solubility and bonding stability (μTBS and scanning electron microscope (SEM) of metalloproteinases inhibitors (MMPi), previously synthetized. The MMPi were used with an adhesive and the bonding stability was tested after twenty four and six months. The MMPi were compared with chlorhexidine 0,2% and 2%. Materials and methods: After the development of MMPi (K8, K12, K16) and their enzymatic inhibition analyses, the %DC was measured using Fourier transform near-infrared spectroscopy (FTIR spectroscopy) and the solubility was calculated using ACD/Percepta software (ACD/Labs algorithms model). The cytotoxicity was measured by means of MTT assay in two cell lines NIH 3T3 and MG-63. The μTBS was tested based on ISO/TS 11405:2015. Thirty extracted molars were randomly divided in six groups: OPT FL (Optibond FL- Kerr Corporation, Orange, CA, USA); K8 (Optibond FL + K8); K12 (Optibond FL + K12); K16 (Optibond FL + K16); CHX 0,2 (Optibond FL + CHX 0,2%) and CHX 2 (Optibond FL- + CHX 2%). The data was analyzed by repeated measures ANOVA with (a=0,05). The beans of each group were analyzed with a SEM. Results: MMPi Profiling Kit, Colorimetric by Enzo Life Sciences was used, and the K12 had the best inhibition percentage. The %DC decreased compared to control group, with the exception of K8 inhibitor; the eluates of the inhibitors are not toxic at 20 μl concentration. The μTBS was not statistically significant different between groups. The CHX 0,2 and K12 were the groups with less hybrid layer degradation. Conclusions: The adhesive strategy with MMPi did not show differences compared to the control group in μTBS; however, the hybrid layer with SEM seems to be more stable after six months.