Use of minimally invasive techniques in the diagnosis and characterization of lymphoid hematopoietic tumors in dogs

Abstract

ABSTRACT - Lymphoma is the most common hematopoietic tumor in dogs, presenting a variety of clinical and morphological forms originating from lymphoid cells. In contrast, multiple myeloma is considered rare. The introduction of minimally invasive techniques in human medicine has had a significant impact, allowing for the accurate diagnosis, screening, and monitoring of neoplasms in humans. The potential for applying these techniques to domestic animals, such as dogs with hematopoietic neoplasias, still lacks the necessary additional studies to assess their efficacy and applicability in veterinary medicine. The main objective of this work was the implementation and use of minimally invasive diagnostic techniques, such as cytology, cell block, immunocytochemistry and PCR for antigen receptor rearrangements (PARR), in the diagnosis of dogs with suspected lymphoid hematopoietic tumors. Initially, the research focused on evaluating and comparing various minimally invasive techniques used in cytological aspirates to diagnose multicentric lymphomas in 38 dogs. It was shown that these approaches make it possible to partially diagnose and characterise multicentric lymphoma in dogs, suggesting the feasibility of obtaining the necessary diagnostic material in a single consultation, which leads to significant gains in terms of cost and time savings without compromising diagnostic accuracy. This work then reinforces the importance of using cell blocks in the diagnosis of lymphoid cell neoplasms by demonstrating their potential in aiding the diagnosis of canine multiple myeloma (MM). Faced with the hypothesis of lymphoid neoplasms with a plasma cell phenotype in dogs, cell blocks from aspiration punctures of the spleen and bone marrow were taken for immunohistochemical analysis. The results of the immunophenotyping allowed the diagnosis of MM and excluded other lymphoid neoplasms. Finally, the applicability of the cytoblock and clonality assays in the diagnosis of a complex case of gastrointestinal lymphoma was evaluated. In this clinical case, the initial diagnosis observed by cytology and cytoblock techniques of liver aspirates was suggestive of lymphoma with hepatic dissemination and indicated rare co-expression of CD3 and CD20 positive lymphocytes, which was confirmed in histopathology with immunohistochemistry of endoscopic biopsies. The final diagnosis of T-cell lymphoma associated with type 2 enteropathy with hepatic infiltration was established by PARR following the detection of the monoclonal T-cell rearrangement. These results, therefore, demonstrate the utility and accuracy of minimally invasive methods in diagnosing and characterizing diferents types of lymphoid hematopoietic tumors in dogs

RESUMO - USO DE TÉCNICAS MINIMAMENTE INVASIVAS NO DIAGNÓSTICO E CARACTERIZAÇÃO DE TUMORES HEMATOPOIÉTICOS LINFÓIDES EM CÃES - O linfoma é o tumor hematopoiético mais comum em cães, apresentando uma variedade de formas clínicas e morfológicas originadas em células linfóides. Em contraste, o mieloma múltiplo é considerado raro. A introdução de técnicas minimamente invasivas na medicina humana teve um impacto significativo, permitindo o diagnóstico, rastreio e monitorização precisos de neoplasias em seres humanos. O potencial de aplicação destas técnicas em animais domésticos, como cães com neoplasias hematopoiéticas, ainda carece de estudos adicionais necessários para avaliar a sua eficácia e aplicabilidade na Medicina Veterinária. O principal objetivo deste trabalho foi a implementação e utilização de técnicas de diagnóstico minimamente invasivas, como citologia, citobloco, imunocitoquímica e PCR para rearranjos de receptores de antigénios (PARR), no diagnóstico de cães com suspeita de tumores hematopoiéticos linfoides. Inicialmente, a pesquisa se concentrou em avaliar e comparar diversas técnicas minimamente invasivas utilizadas em aspirados citológicos para diagnosticar linfomas multicêntricos em 38 cães. Foi demonstrado que essas abordagens permitem diagnosticar e caracterizar parcialmente o linfoma multicêntrico em cães, sugerindo a viabilidade de obtenção do material diagnóstico necessário em uma única consulta, o que leva a ganhos significativos em termos de economia de custos e tempo, sem comprometer a precisão diagnóstica. Este trabalho reforça ainda, a importância da utilização de citoblocos no diagnóstico de neoplasias de células linfóides, demonstrando seu potencial no auxílio ao diagnóstico do mieloma múltiplo (MM) canino. Diante da hipótese de neoplasias linfóides com fenótipo plasmocitário em cães, foram realizados citoblocos de punções aspirativas de baço e medula óssea para análise imuno-coloração. Os resultados da imunofenotipagem permitiram o diagnóstico de MM e excluíram outras neoplasias linfóides. Por fim, avaliou-se a aplicabilidade das técnicas de citobloco e clonalidade no diagnóstico de um caso complexo de linfoma gastrointestinal. Neste caso clínico, o diagnóstico inicial observado pelas técnicas de citologia e citobloco de aspirados hepáticos foi sugestivo de linfoma com disseminação hepática e indicou rara co-expressão de marcadores CD3 e CD20 em linfócitos, o que foi confirmado na histopatologia com imuno-histoquímica de biópsias endoscópicas. O diagnóstico final de linfoma de células T associado à enteropatia tipo 2 com infiltração hepática foi estabelecido por PARR após a detecção do rearranjo monoclonal de células T. Estes resultados, portanto, demonstram a utilidade e acurácia de métodos minimamente invasivos no diagnóstico e caracterização de diferentes tipos de tumores hematopoiéticos linfoides em cães