HPLC-MS analysis of Atorvastatin and its metabolites in plasma and prostate cancer tissue

Abstract

The aim of the proposed work was to develop and validate a simple and sensitive method for the analysis of atorvastatin (ATV) and its metabolites in human plasma and in the tissue (prostate) using liquid chromatography-tandem mass spectrometry. 57 samples of plasma and tissue from prostate cancer patients, treated with atorvastatin, were analyzed. Mass spectrometry detection was carried out in positive electrospray ionization mode, with multiple reaction monitoring scan. The assay exhibited a linear dynamic range from 0,25-250 ng/mL and the calibration curves for the analytes were linear (R20.8997). The accuracy (86.2-111.8%), matrix effect (80.6-94.71%), overall recovery (74.7-81.8%) were another parameters evaluated based on guidelines of the European Medicines Agency (EMA) and Food and drug Administration (FDA). The validated method was successfully applied to analyze human plasma samples for application in pharmacokinetic, bioavailability or bioequivalence studies. Despite ATV was detected in prostate, further studies are still required to conclude the mechanism how the drug can go into the tissue and the way it can lead to benefits in prostate cancer.

O objetivo do trabalho proposto foi desenvolver e validar um método simples e sensível para a análise e deteção da atorvastatina (ATV) e respetivos metabolitos presentes no plasma humano e no tecido (próstata), utilizando a cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa (HPLC-MS/MS). 57 amostras de plasma e tecido provenientes de pacientes com cancro de próstata foram analisadas, todos eles a realizar tratamento com atorvastatina. A deteção de espectrometria de massa foi realizada através de ionização por electrospray (modo positivo), com monitoramento de múltiplas reações. Neste ensaio obteve-se um intervalo linear de concentrações entre 0,25-250 ng/mL e as curvas de calibração para os analitos foram igualmente lineares e aceitáveis (R20.8997). A exactidão (86.2-111.8 %), o efeito da matriz (80.6-94.71 %), a taxa de recuperação (74.7-81.8 %) foram outros parâmetros avaliados, baseados em guidelines da Agência Europeia do Medicamento (EMA). O método validado tem vindo a ser aplicado com sucesso, com o intuito de analisar amostras de plasma humano para aplicação em estudos de farmacocinética, biodisponibilidade ou bioequivalência. Apesar da atorvastatina ter sido detetada na próstata, ainda são necessários estudos adicionais para concluir acerca do mecanismo pelo qual o fármaco consegue atravessar o tecido e qual o seu impacto e possível benefício em doentes com cancro da próstata.