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Restrição de ADN, perfil de ribotipia e de proteínas da membrana externa de Campylobacter jejuni e Campylobacter fetus e sua comparação com biotipia, serotipia e fagotipia

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O estudo da bio-ecologia do Campylobacter torna-se indispensável para a identificação das suas vias de infecção e de difusão na comunidade, tendo em vista a adopção de medidas mais adequadas de profilaxia. Para tal recorre-se a marcadores epidemiológicos que permitem a diferenciação de cada uma das espécies que integra aquele género bacteriano e o rastreio das suas cadeias de infecção. De entre as espécies até à data relatadas, a de Campylobacter jejuni e de Campylobacter fetus assumem um papel de maior relevo nas patologias humana e veterinária, sendo o Campylobacter jejuni actualmente reconhecido como um dos mais importantes agentes etiológicos de gastrenterites humanas, particularmente nos Países desenvolvidos, enquanto o Campylobacter fetus. para além de também poder originar septicemias e abortos sépticos em humanos, induz abortos sépticos e esterilidade em ovinos, bovinos e suínos. Comparativamente a outras espécies, a caracterizacão fenotípica de Campvlobacter encontra-se dificultada pelo facto destes microrganismos não utilizarem hidratos de carbono como fonte de energia os quais, não sendo assim metabolizados, não podem ser aplicados como parâmetros bioquímicos, ou seja, como marcadores fenotípicos tal como frequentemente se observa no estudo epidemiológico de outras infecções bacterianas. A identificação de espécies enteropatogénicas de Campylobacter efectuada através das suas características morfológicas e bioquímicas. A diferenciação das estirpes pertencentes àquela espécie pode ser efectuada pelos sistemas de biotipia propostos por Skirrow e Lior para além de outros. Porém, a descriminacào intra-espécie conseguida com estes marcadores é baixa, tornando-se necessário para tal fim o recurso a outros métodos de caracterização. Consequentemente, Penner e Lior, entre outros, desenvolveram sistemas de serotipia enquanto Grajewski e Salama estabeleceram sistemas de fagotipia os quais, no entanto, são complexos e apenas acessíveis a laboratórios de referência e/ou de investigação científica. Mais recentemente e numa tentativa de se ultrapassarem as dificuldades e as desvantagens inerentes àqueles sistemas de biotipia, serotipia e fagotipia, têm sido propostos métodos rápidos e de execução relativamente fácil no âmbito da Biologia Molecular tais como sejam. por exemplo, os destinados à análise de perfis electroforéticos de proteínas (totais e membranares), de ADNs plasmídicos. de restrição do ADN cromossomal ou plasmídico (que abreviadamente se designa por "Restriction Endonuclease Analvsis" ou seja. REA), de ribotipos. de polimorfismo dos fragmentos de ADN aleatoriamente amplificados (a que vulgarmente se denomina «Randomly Amplifled Polymorfic DNA, ou seja, PAPD) e, ainda, de cromossomas resolvidos por electroforese em campo pulsado (que frequentemente se designa por "Pulsed field Gel Electrophoresis", ou seja, PFGE).Assim, constitui objectivo deste estudo verificar a utilidade e a eficácia de algumas destas últimas metodologias (em relação às descritas para a biotipia, serotipia e fagotipia) na caracterização de estirpes de campylobacter assim como avaliarqual o método de Biologia Molecular (ou combinação deles) que apresenta um melhor poder discriminatório na tipificação destas estirpes.

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Contexto Educativo

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Separata da Revista Portuguesa de Doenças Infecciosas. 1996;19(3-4):159-168

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